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bayu18

新虫 (正式写手)

[求助] 荧光定量数据分析 已有2人参与

我现在做荧光定量PCR,得到下面的数据(CK、1、2代表不同植株):
                  CK-1                  CK-2            CK-3                                1--1                        1--2                         1--3                  2--1              2--2                     2--3
内参基因        24.34666667          24.23        24.47666667        24.77333333        24.76333333        24.94333333           25.05        24.93333333        24.80333333
目的基因    39.14                 39.7        37.73                   36.8                          36.83                  37.31          38.16               N/A                        38.72
我是个新手,看很多人说CT值不要大于35,有的说37,是不是我得到的数据不可信啊?我下面该怎么做?谢谢!!!
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double可

金虫 (初入文坛)

引用回帖:
11楼: Originally posted by bayu18 at 2014-01-14 13:13:38
你们用的多大体系,cDNA的量多少?...

20ul,cDNA值没测过。RNA反转录时1-3ug,反转录之后的模板稀释20倍左右左Qpcr
早已不承认还有什么神
13楼2014-01-14 13:15:48
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lvbobo823

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2014-01-14 08:33:08
数据还可以,你的基因表达本来就少CT值过大也没办法。顶多你反转时提高些RNA量,但估计也改变不了多少。
hehe
2楼2014-01-13 21:29:55
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bayu18

新虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by lvbobo823 at 2014-01-13 21:29:55
数据还可以,你的基因表达本来就少CT值过大也没办法。顶多你反转时提高些RNA量,但估计也改变不了多少。

从哪里看出来我的基因表达本来少,CT值?
3楼2014-01-14 08:40:16
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lvbobo823

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
bayu18: 金币+1, ★有帮助 2014-01-14 13:07:28
引用回帖:
3楼: Originally posted by bayu18 at 2014-01-14 08:40:16
从哪里看出来我的基因表达本来少,CT值?...

你对照CT都在37以上,相比你的管家基因表达量。
hehe
4楼2014-01-14 08:44:50
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