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renyuziji

铜虫 (小有名气)

[求助] 用zeocin筛选酵母转化子要培养多长时间啊已有2人参与

如题
因为老师赶进度,所以直接让我在zeocin  50微克/ml和300微克/ml的两块YPD平板上分别涂板,这两个浓度是说明书上的临界浓度。已经长了三天了,两块板没啥反应,用这种zeocin筛选过大肠没有问题。请问做过zeocin酵母转化的高人要培养多久啊??
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加油吧!孩子
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lpzl

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
renyuziji: 金币+2, ★★★很有帮助 2014-01-14 16:00:37
一般2到3天转化子会长滴。。。
Start_everyday_with_a_new_hope,_leave_bad_memories...
2楼2014-01-13 16:49:04
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renyuziji

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by lpzl at 2014-01-13 16:49:04
一般2到3天转化子会长滴。。。

啊!!为啥我的都不长,是细胞浓度太低了吗。。。
加油吧!孩子
3楼2014-01-13 17:06:50
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lpzl

木虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by renyuziji at 2014-01-13 17:06:50
啊!!为啥我的都不长,是细胞浓度太低了吗。。。...

有可能,或许转化不成功???
Start_everyday_with_a_new_hope,_leave_bad_memories...
4楼2014-01-13 21:20:47
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renyuziji

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by lpzl at 2014-01-13 21:20:47
有可能,或许转化不成功???...

你做过转化酵母吗??
加油吧!孩子
5楼2014-01-14 16:01:30
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蓝瘦子

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
5楼: Originally posted by renyuziji at 2014-01-14 16:01:30
你做过转化酵母吗??...

我做过转化酵母的,2到3天能出单菌落,我有两个目的片段在做,其中一个是GFP的,这个每个挑的菌都有表达,但是另一个就怎么都表达不到,基因组pcr也P不出来,愁死了。不可能目的片段不同就一个能转进去一个转不进去吧
6楼2014-01-14 21:13:47
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l00899

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
我一般用100微克/ml的 zeocin,一般要3天以上才能看到菌落。
7楼2014-01-15 17:07:58
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lpzl

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
5楼: Originally posted by renyuziji at 2014-01-14 16:01:30
你做过转化酵母吗??...

做过。我加zeocin浓度,200mg/ml,一般30度3天就能看到菌落。。
Start_everyday_with_a_new_hope,_leave_bad_memories...
8楼2014-01-15 20:53:37
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