应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 表达抗虫蛋白没活性，想确定表达没出错，可以对包涵体蛋白测序吗？ 求指教，谢谢
51/1返回列表
查看: 705  |  回复: 4
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

huangsz997

铜虫 (小有名气)

[求助] 表达抗虫蛋白没活性，想确定表达没出错，可以对包涵体蛋白测序吗？ 求指教，谢谢 已有2人参与

做抗虫蛋白的表达，最近知道抗虫活性实验结果不理想，诱导的蛋白在sds-page上与预期大小一致。现在想对蛋白测序来确定表达了目的蛋白，蛋白在包涵体中，可以用包涵体拿去测序吗？有了解的吗，本人对蛋白测序一点不清楚 求指教……谢谢
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2014-01-12 12:34:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2014-01-12 18:51:07
蛋白测序是在变性条件下的，与是否有活性无关。
赞一下 回复此楼
2楼2014-01-12 17:23:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

huangsz997

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by cicelyzh at 2014-01-12 17:23:49
蛋白测序是在变性条件下的，与是否有活性无关。

谢谢你的回答。前两天给蛋白测序公司打电话，他说得把蛋白溶在溶剂中，并且样品浓度也有要求，我的样品只有在包涵体时的浓度符合他的要求，如果变性再复性远远达不到他的测序要求浓度……
赞一下 回复此楼
3楼2014-01-22 09:39:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)
引用回帖:
3楼: Originally posted by huangsz997 at 2014-01-22 09:39:19
谢谢你的回答。前两天给蛋白测序公司打电话，他说得把蛋白溶在溶剂中，并且样品浓度也有要求，我的样品只有在包涵体时的浓度符合他的要求，如果变性再复性远远达不到他的测序要求浓度……...

你可以用SDS蛋白上样buffer溶解，SDS有很强的增溶作用，应该能达到需要的浓度。
赞一下 回复此楼
4楼2014-01-26 09:49:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

reallpf

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

想看看表达的蛋白是否有问题，测序应该是可以的。但是你在做重组质粒时，DNA序列没问题应该ok的。真要看得到的是否是你要的蛋白，建议直接wester，同时做个MS，两个实验都是1天能够完成的，快速，准确。
赞一下 回复此楼
5楼2014-01-26 12:28:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 huangsz997 的主题更新
51/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[博后之家] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +7 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 8/400 2026-08-30 01:14 by ZPa0EcMwuECS
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +6 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 9/450 2026-08-30 01:04 by ZPa0EcMwuECS
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +4 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 5/250 2026-08-30 00:52 by ZPa0EcMwuECS
[硕博家园] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 gy1nBQXYQJqL 2026-08-29 3/150 2026-08-29 21:35 by 4qO8zhfjr2AX
[博后之家] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 gy1nBQXYQJqL 2026-08-29 5/250 2026-08-29 21:22 by 4qO8zhfjr2AX
[基金申请] 国自然面上复盘~欢迎讨论 (金币+15) +15 晴天加油 2026-08-26 16/800 2026-08-29 18:28 by symmetry
[论文投稿] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 gy1nBQXYQJqL 2026-08-29 3/150 2026-08-29 18:26 by 4FFAWE8HcgUD
[基金申请] 有没有仍没收到信息的 +5 德尚中行 2026-08-27 6/300 2026-08-29 18:10 by manplx
[基金申请] 为什么到现在没收到通知？ +4 tannykie 2026-08-29 4/200 2026-08-29 17:14 by lmz0216
[基金申请] 麻烦专家们看看评委们的意见（F口面上） +5 gdd2018 2026-08-28 10/500 2026-08-29 14:10 by Jacob678
[教师之家] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 7/350 2026-08-29 09:26 by G6APbkg8SA6w
[基金申请] 为什么资助数各大高校都创新高，自己申请怎么就这么难 +12 Kittylucky 2026-08-27 13/650 2026-08-29 00:04 by superceng
[基金申请] 面上合作单位盖章 +5 ssyjh 2026-08-27 5/250 2026-08-27 20:50 by gdfollow
[文学芳草园] 梦想 +3 myrtle 2026-08-26 3/150 2026-08-27 10:01 by angelyueyi
[基金申请] 为什么 国际(地区)合作与交流项目 没有放榜？ 10+3 majunge000 2026-08-26 11/550 2026-08-27 08:42 by 北京莱茵编辑
[基金申请] 2026年的国家社科基金项目通讯评审的新规则与新动向、新挑战 +7 process2012 2026-08-23 10/500 2026-08-26 19:23 by hmhminy
[基金申请] 2026年8月25日国自然放榜前突然收到列入评审专家邮件，有关系吗？ +25 木水思豆 2026-08-25 28/1400 2026-08-26 14:53 by draco1987
[基金申请] 国合现在查不到了吗？ +10 chengyan1220 2026-08-24 20/1000 2026-08-26 08:57 by peasantsprig
[基金申请] 在坚冰还盖着北海的时候，我看到了怒放的梅花。 (金币+10) +6 ziyangfang 2026-08-25 9/450 2026-08-25 20:26 by huagongfeihu
[基金申请] 如果此刻你正在为国基感到焦虑，不妨来听听这首《基金之外》 +8 scalable 2026-08-24 8/400 2026-08-25 12:52 by jnhyjjm
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭