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文飞778899

银虫 (小有名气)

[求助] PCR扩增结果已有4人参与

亲们,帮我看下这图片,没有条带,只是在加样口有少许亮带,这亮带是什么呢?谢谢~~P了好多次,酶也换了,模板也一直重提,体系也试了好几种,就是这结果,真心难过!
PCR扩增结果
F3.jpg
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gyl121

新虫 (正式写手)

经过做了这么几天的重复,我感觉到,这个实验DNA模板是没得什么问题的,问题的原因就在于引物对模板的要求不同,有些引物要求小,这个可能大,我在摸索个人的实验,我的建议是退火温度用别人的,可适当降低,同时提高DNA的浓度,相应调节引物,也许可以解决
不经一番寒彻骨,怎得梅花扑鼻香?为科学进步不懈努力
11楼2014-01-05 11:35:04
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gyl121

新虫 (正式写手)

怎么没有人回答呢?我也是这个问题,这两天做这个实验,DNA别的引物都可以扩增出条带,就这个引物不靠谱,我都累了; 所以,我觉得不是DNA模板的原因,点样孔部分出现特别亮(我的实验)我觉得DNA浓度高了,可是稀释了5,10倍结果没多大变化,所以认为是浓度不合适,希望与楼主交流下意见
不经一番寒彻骨,怎得梅花扑鼻香?为科学进步不懈努力
2楼2014-01-03 20:00:49
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lhf903

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励交流! 2014-01-04 00:25:20
大部分原因可能是模板问题
3楼2014-01-03 20:28:00
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紫色的刺客

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励交流! 2014-01-04 00:25:29
这个明显没结果,建议你先用别人报道过的基因引物做个阳性对照,如果阳性对照都没跑出来,那就是模板有问题,如果阳性对照有结果,就是你这个引物问题,建议做个温度梯度
4楼2014-01-03 20:54:59
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