应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 质粒pPICZA用XhoI与NotI酶切，酶切5h后条带变成250bp左右
71/1返回列表
查看: 1982  |  回复: 6
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

553173045

铜虫 (初入文坛)

[求助] 质粒pPICZA用XhoI与NotI酶切，酶切5h后条带变成250bp左右 已有4人参与

pPICZA提质粒跑胶有两条带，一条大概在250bp左右，另外一个是3000左右的条带，经XhoI与NotI酶切后，跑胶条带全部在250bp左右，另外一条带全部消失了 ，请问是怎么回事，是DNA裂解酶污染吗？胶应该没问题，Marker都正常.
回复此楼

» 猜你喜欢
没有完成不了的事，只有自己愿不愿意去做
1楼 2014-01-03 15:46:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lihaokkkk

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
我不想打击你
我认为时候未到，，，
你等春天了，下雨的日子，肯定能解决问题
赞一下 回复此楼
2楼2014-01-03 16:04:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hathryn

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励交流！ 2014-01-04 00:32:35
250bp的那个是杂带吧？如果酶切位点是单一的话，质粒切时间太长可能会切碎，你用的酶是哪个公司的？有的公司的酶不稳定，时间一长没有星号活性的都有星号活性了……
赞一下 回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

553173045
3楼2014-01-03 18:33:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
250bp的带可能是RNA。酶切后大条带完全消失可能是酶切体系有污染。你试试用同样的buffer和酶切其它质粒看看是不是也有问题。
赞一下 回复此楼
4楼2014-01-04 06:50:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

553173045

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by cicelyzh at 2014-01-04 06:50:18
250bp的带可能是RNA。酶切后大条带完全消失可能是酶切体系有污染。你试试用同样的buffer和酶切其它质粒看看是不是也有问题。

我试过其他的酶,但效果是一样的.250bp可能是RNA
赞一下 回复此楼
没有完成不了的事，只有自己愿不愿意去做
5楼2014-01-07 22:01:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

553173045

铜虫 (初入文坛)
送红花一朵
引用回帖:
3楼: Originally posted by hathryn at 2014-01-03 18:33:41
250bp的那个是杂带吧？如果酶切位点是单一的话，质粒切时间太长可能会切碎，你用的酶是哪个公司的？有的公司的酶不稳定，时间一长没有星号活性的都有星号活性了……

还在验证中,但酶的问题可能性很小,但还是谢谢你!
赞一下 回复此楼
没有完成不了的事，只有自己愿不愿意去做
6楼2014-01-07 22:06:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lxyzsx

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

建议重新摇菌液，提取质粒；再不行的话转克隆感受态试试

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
赞一下 回复此楼
7楼2014-01-08 06:48:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 553173045 的主题更新
71/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考博] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 C79jjtjAKjEn 2026-09-15 3/150 2026-09-18 03:42 by cITaGg3p5edr
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 C79jjtjAKjEn 2026-09-15 3/150 2026-09-18 03:30 by cITaGg3p5edr
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 mibUvS8DDCwf 2026-09-15 3/150 2026-09-18 03:04 by cITaGg3p5edr
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 vZfe6xYu34yj 2026-09-14 3/150 2026-09-18 02:30 by cITaGg3p5edr
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +5 Aj1rhIDL5ixY 2026-09-14 6/300 2026-09-18 01:54 by cITaGg3p5edr
[考博] 申博发邮件 +6 Lmengk 2026-09-15 7/350 2026-09-17 23:36 by Lmengk
[找工作] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 4/200 2026-09-17 22:39 by cuPZTDXS3VOd
[考研] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +6 Aj1rhIDL5ixY 2026-09-14 6/300 2026-09-17 14:17 by ObVzqQQh1rrE
[考研] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +4 0pYnUiPDfdnk 2026-09-14 4/200 2026-09-17 14:15 by ObVzqQQh1rrE
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +5 23jxep3nCNZb 2026-09-14 5/250 2026-09-17 13:53 by ObVzqQQh1rrE
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +4 s3fFTmArrBt6 2026-09-14 5/250 2026-09-17 12:39 by ObVzqQQh1rrE
[找工作] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +8 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 8/400 2026-09-17 11:27 by UAIjTRMuUFoj
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 mibUvS8DDCwf 2026-09-15 4/200 2026-09-17 06:26 by k06BKNblrGRH
[公派出国] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 23jxep3nCNZb 2026-09-14 3/150 2026-09-17 03:52 by k06BKNblrGRH
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +5 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 5/250 2026-09-16 02:14 by DgNGHc3h5tPl
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 6F5UbRU2I5hL 2026-09-14 3/150 2026-09-15 17:39 by CgyNCDVNhGVg
[考博] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +7 s3fFTmArrBt6 2026-09-14 7/350 2026-09-15 16:23 by CgyNCDVNhGVg
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +4 6F5UbRU2I5hL 2026-09-14 4/200 2026-09-15 08:02 by C79jjtjAKjEn
[教师之家] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +4 s3fFTmArrBt6 2026-09-13 4/200 2026-09-15 06:50 by 5BDX0d0WFp7t
[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +6 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 6/300 2026-09-15 05:38 by 5BDX0d0WFp7t
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭