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谯城俊杰

新虫 (初入文坛)

[求助] 关于血浆萃取后不干净的疑惑,请大家帮帮忙已有1人参与

各位同学,我目前正在做药代动力学的内容。做的是几种生物碱,已确定用的溶剂是甲基叔丁基醚和二氯甲烷(6:4)的比例进行液液萃取,因为是生物碱,我在血浆萃取前加了50ul氨水(10%)碱化。具体做法是200ul血浆,加80ul混标,加40ul内标,标准品都是用甲醇溶解的。然后涡旋混匀后加1ml萃取剂萃取。放到氮气下挥的时候发现变浑浊,而且还会有类似碎的豆腐渣一样的东西。考虑是蛋白被萃取出来了。但是我十分不明白的是,蛋白质为什么这么多会有机溶剂被萃取出来呢?而且实现都是经过高速离心了的。我的感觉是水在该萃取剂中有一定溶解度,然后加了氨水提高了蛋白的在萃取剂中溶解度。所以萃取的不干净。我把氨水换成40ul碳酸钠碱化,发现浑浊情况好了很多。诚恳请教大家这个问题的原因
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bigpalewolf

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


xiaoxiao270: 金币+1, 3Q 2014-02-09 21:12:25
你这方法有问题啊, 200ul血浆,都加入140ul的甲醇了,相当于直接沉淀蛋白了。建议把标准品和内标的贮备也浓度提高一点, 少加入一点甲醇。
2楼2014-02-09 01:23:48
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