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谯城俊杰

新虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 8
帖子: 16
在线: 10小时
虫号: 1362814
注册: 2011-08-07
性别: GG
专业: 中药药性理论

[求助] 关于血浆萃取后不干净的疑惑，请大家帮帮忙已有1人参与

各位同学，我目前正在做药代动力学的内容。做的是几种生物碱，已确定用的溶剂是甲基叔丁基醚和二氯甲烷（6：4）的比例进行液液萃取，因为是生物碱，我在血浆萃取前加了50ul氨水（10%）碱化。具体做法是200ul血浆，加80ul混标，加40ul内标，标准品都是用甲醇溶解的。然后涡旋混匀后加1ml萃取剂萃取。放到氮气下挥的时候发现变浑浊，而且还会有类似碎的豆腐渣一样的东西。考虑是蛋白被萃取出来了。但是我十分不明白的是，蛋白质为什么这么多会有机溶剂被萃取出来呢？而且实现都是经过高速离心了的。我的感觉是水在该萃取剂中有一定溶解度，然后加了氨水提高了蛋白的在萃取剂中溶解度。所以萃取的不干净。我把氨水换成40ul碳酸钠碱化，发现浑浊情况好了很多。诚恳请教大家这个问题的原因

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广阔天地，大有作为！

1楼 2013-12-31 21:38:04

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bigpalewolf

金虫 (正式写手)

应助: 28 (小学生)
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在线: 80.2小时
虫号: 275662
注册: 2006-09-02
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专业: 药剂学

【答案】应助回帖

★
xiaoxiao270: 金币+1, 3Q 2014-02-09 21:12:25

你这方法有问题啊， 200ul血浆，都加入140ul的甲醇了，相当于直接沉淀蛋白了。建议把标准品和内标的贮备也浓度提高一点，少加入一点甲醇。

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