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liuqingrui5

金虫 (小有名气)

[求助] 为什么同样的PCR条件结果重复不出来呢,P出来一次之后就P不出来了 已有10人参与

为什么同样的PCR条件结果重复不出来呢,P出来一次之后就P不出来了,重复了好几次都不行,超级郁闷
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打败番茄炒蛋

新虫 (小有名气)

引用回帖:
22楼: Originally posted by fuchange918 at 2014-09-24 19:13:02
我前两天也遇到了同样的问题   用rTaq酶,跑的温度梯度确定最适温度,六个基因全都跑出来了,最适温度也确定了。然后准备PCR,跑胶切胶回收的时候怎么也跑不出来,换了ExTaq也没跑出来。正好有点库存的LA Taq酶,六 ...

你好大神!我最近也是被同样问题困扰,关键是我电泳跑出条带来了,但片段大小不对,应该在15kb左右,我P了个4kb的,送去测序也没测出来。这种情况下,还需要做温度梯度PCR吗?
天生自弃难丽质
23楼2015-04-20 14:36:11
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yang0071

木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
小概率事件罢了
别灰心。。。。。。。。。

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

2楼2013-12-30 20:45:16
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liuqingrui5

金虫 (小有名气)

送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by yang0071 at 2013-12-30 20:45:16
小概率事件罢了
别灰心。。。。。。。。。

重复了5次了都重复不出来
3楼2013-12-30 20:48:35
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yang0071

木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

你就把你已经p出来的东西当成模板,再p一次

或者   换个pcr做做看

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

4楼2013-12-30 20:51:14
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