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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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why0393

金虫 (正式写手)


[交流] PCR引物

各位分子方面的大虾帮忙看看啊,本人根据几株公布BPIV3全序分析的保守区设计的引物,长23bp,昨天做RT-PCR结果见附图。
引物区间目的条带318bp,引物Tm值57℃,PCR退火温度54℃
本人分析原因如下:
1、引物二聚体:不可能,因为其他三个泳道没有出现
2、错配:不可能,oligo7分析错配区间 没有低于100bp的
3、其他:等待各位大侠指点啊

本人初次接触分子实验,单抗方面的
PCR引物
40WJ[PE1PRZ[WLL7VPNNLNG.jpg
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lidonghong

金虫 (正式写手)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
47楼: Originally posted by why0393 at 2014-01-02 16:59:33
身边的分子方面的同事也这么说,正在尝试...

好,预祝你实验早日成功!
49楼2014-01-03 08:08:27
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lidonghong

金虫 (正式写手)


★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
why0393(金币+1): 谢谢参与
gyesang: 金币+2, 鼓励交流! 2013-12-30 18:00:32
why0393: 金币+5 2014-01-02 16:58:57
从图来看,pi3是扩增出来了,但有非特异性扩增,退火温度低了点,可提高。后三孔就没有出来,先做个梯度PCR,摸摸条件,看看这五个样本是不是还是不会出来,如果不出来的话,那基本上可能是你引物的问题,当然也不排除体系、扩增酶等其他条件....
2楼2013-12-30 17:29:21
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