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gyl121

新虫 (正式写手)

引用回帖:
8楼: Originally posted by xin641685388 at 2014-01-07 15:52:23
可是现在关键是这5个基因一比对基本没有什么同源性,我设计了三对不同长度的(7bp/10bp/12bp)的简并引物,这些引物都是3‘端的5个碱基能够和这5个基因互补配对,5’端分别加了2/5/7个简并碱基,设计完后Tm值太低了 ...

我的意思是,你可以不用同一条引物,把他们全部扩出来,将5个,分成3个和3个序列比,或者再多些(自己选择重复的),因为2,3个序列比与5个序列比的同源性会有很大的差异的,不要想着一步就成,然后温度尽量往50度设计,实在不好加,就搞到40度左右也应该的,会有多态性的影响罢了
不经一番寒彻骨,怎得梅花扑鼻香?为科学进步不懈努力
11楼2014-01-08 09:16:28
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