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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 关于一对引物同时扩增多个不同基因的问题
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gyl121

新虫 (正式写手)
引用回帖:
8楼: Originally posted by xin641685388 at 2014-01-07 15:52:23
可是现在关键是这5个基因一比对基本没有什么同源性，我设计了三对不同长度的（7bp/10bp/12bp）的简并引物，这些引物都是3‘端的5个碱基能够和这5个基因互补配对，5’端分别加了2/5/7个简并碱基，设计完后Tm值太低了 ...

我的意思是，你可以不用同一条引物，把他们全部扩出来，将5个，分成3个和3个序列比，或者再多些（自己选择重复的），因为2,3个序列比与5个序列比的同源性会有很大的差异的，不要想着一步就成，然后温度尽量往50度设计，实在不好加，就搞到40度左右也应该的，会有多态性的影响罢了
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不经一番寒彻骨，怎得梅花扑鼻香？为科学进步不懈努力
11楼2014-01-08 09:16:28
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