24小时热门版块排行榜    

查看: 2225  |  回复: 14
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

农虫

金虫 (初入文坛)

[求助] 提基因组DNA遇到的问题,麻烦大家给帮忙看看 已有1人参与

这是我提病毒DNA基因组的电泳图,左右两次提的结果。用的是promega试剂盒,好像是提细菌的,但能提出病毒DNA来,我也就用了,MARKER是2000bp,想问一下,
1我提的质量怎么样,做酶切会不会有影响?
2下面的两条带是什么,提基因组怎么会有这样的带?

非常感谢!
提基因组DNA遇到的问题,麻烦大家给帮忙看看
2013-12-26-17-08-31.jpg
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

农虫

金虫 (初入文坛)

引用回帖:
13楼: Originally posted by luwei13566 at 2013-12-28 22:37:55
你那个提基因组的试剂盒应该不是个专门提取病毒基因组的试剂盒吧~~没用过这个试剂盒,你给我说说都是什么步骤啊~?

病毒多角体沉淀加核裂解液,65°C30min,加蛋白沉淀液,冰上5min,加异丙醇,加70%乙醇,然后溶解。
14楼2013-12-29 13:27:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 15 个回答

农虫

金虫 (初入文坛)

我的病毒DNA是双链环状。病毒不含RNA。
之前用苯酚抽提,加无水乙醇后又白色的沉淀,但260/280还可以,260/230有点低。
2楼2013-12-26 17:28:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

三蛰

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
农虫: 金币+5, 有帮助, 因为有事,跑胶的时间短了些。胶浓度不到1% 2013-12-27 11:19:01
gyesang: 金币+2, 鼓励交流! 2013-12-28 20:54:51
建议你先做一块质量好点的胶,marker没跑开,我看如果跑开了,基因组提取的还行。
我不会!
3楼2013-12-26 20:07:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

luwei13566

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
农虫(kx444555代发): 金币+4, 鼓励交流 2013-12-27 09:43:57
农虫: 金币+10, 有帮助 2013-12-27 11:15:22
marker是DL2000???Marker跑不开确实无法判断,但是你的2,4,5,6,7泳道同你的marker比亮度不够,目测基因组浓度不高,你的胶是不是浓度太大了啊?
至于下面为什么是两条带,你刚才也说了你的病毒基因组是个双链环状DNA分子,那存在状态不就跟质粒没什么区别,一般这种环状双链DNA都会有超螺旋,开环,线性三种形式,这样你的条带会有3条大小不同的带,由于你的marker看不清,我不知道大小怎么,不过应该是对的,
其实我有个想法,你把你的病毒的衣壳给处理了后直接用提质粒试剂盒回收不就行了,如果担心你提的量不够,多提几管上一个柱子,直接就把浓度给加上去了。用试剂盒处理的纯度肯定是没问题的

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

大家相互帮助哈
4楼2013-12-26 21:54:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 欢迎发来filecode的Mz6后的代码验证其规律 +32 医学老男孩 2026-08-13 73/3650 2026-08-16 20:47 by yq199112088
[基金申请] 时间戳又变了8-15 +13 archvillain 2026-08-15 25/1250 2026-08-16 20:13 by zhaosm1982
[基金申请] 快农历七夕节了,轻松一下,男人悄悄话,女施主请不要进来。 +3 Tide man 2026-08-14 3/150 2026-08-16 17:47 by jurkat.1640
[基金申请] 咱们一起用铁证分析2026国家社科基金中标与否 +7 启萌科技 2026-08-12 26/1300 2026-08-16 12:35 by 启萌科技
[精细化工] 招聘 金属平磨液,抛光液研发工程师 +3 小天0311 2026-08-14 3/150 2026-08-16 07:31 by H9PLUS
[基金申请] filecode=后面第一个是大写字母 +6 wangze12014 2026-08-14 7/350 2026-08-15 20:12 by gltch
[基金申请] filecode +8 cratir 2026-08-14 12/600 2026-08-15 18:08 by zyfgau
[基金申请] 小木虫上这么多卖论文的,真有人买论文么?感觉没必要啊 +12 Tide man 2026-08-10 13/650 2026-08-15 16:34 by 氺木
[基金申请] 关于Filecode分析方法 +10 majunge000 2026-08-10 13/650 2026-08-15 12:26 by hanpeng972
[基金申请] 各位道友,我要去昆明玩几天,回来见。 +7 Tide man 2026-08-14 8/400 2026-08-15 01:11 by arzu_hma
[基金申请] 奇怪,两个人的filecode固定段从头到尾一模一样 +8 布布和一二 2026-08-10 11/550 2026-08-14 14:58 by Equinoxhua
[基金申请] FileCode能看出啥? +10 要乐观耀哥 2026-08-10 32/1600 2026-08-14 09:37 by 要乐观耀哥
[基金申请] 静等基金结果 +8 gjjjzhong 2026-08-10 21/1050 2026-08-13 17:56 by 且听虎啸
[基金申请] 重要来源:本周末出结果 +10 瞬息宇宙 2026-08-12 10/500 2026-08-13 15:46 by likettle
[基金申请] Filecode 又变了,巨变 +3 WH3796 2026-08-12 4/200 2026-08-13 14:13 by 小木虫6752397
[基金申请] 分享一下我之前已中青C的计划书的filecode +4 布布和一二 2026-08-11 5/250 2026-08-13 12:56 by cratir
[基金申请] 结合人工智能,周易传统文化,filecode打分制来了,3分以上希望很大。 +3 Tide man 2026-08-12 4/200 2026-08-13 08:35 by ZJTJZ
[基金申请] 为什么网上很多人说本周 12号出结果 +6 瞬息宇宙 2026-08-10 7/350 2026-08-11 19:25 by Tide man
[基金申请] 国自然结果 +4 Vierhys 2026-08-10 8/400 2026-08-10 15:06 by Vierhys
[基金申请] 据悉今年马上要出结果了 +7 瞬息宇宙 2026-08-10 8/400 2026-08-10 12:42 by Vivilian
信息提示
请填处理意见