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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 测序公司采用的测序原理是什么？
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sj082csh

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2013-12-25 20:55:11
柠檬可乐星: 金币+3 2013-12-26 15:08:06
gyesang: 回帖置顶 2013-12-26 15:12:09
gyesang: MolEPI+1, 回答的很好！ 2013-12-26 15:15:34
1、你的目的片段和PMD-19T载体连接是不定向的
2、测序公司所说的正向和反向是针对载体（如PMD-19T）来说的
3、对于PMD-19T来说，M13F引物所在的那条链即为所谓的正向（正义），M13R为反向（反义）
4、因此，如果你不知道你的目的片段的连接方向如何，那么正向测序结果既也有可能测出你的目的片段是正向也有可能是反向
5、可以用M13F和你的目的片段的反向引物跑PCR检测，如果能跑出片段则为正向连接，如果M13F和你的目的片段正向引物能跑出来，则为反向连接；
赞一下(4人) 回复此楼
8楼2013-12-25 17:25:08
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