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柠檬可乐星新虫 (小有名气)
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[求助]
测序公司采用的测序原理是什么？ 已有2人参与
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各位大虾：知不知道一些测序公司，比如华大、生工、英潍，现在测序一般用的什么技术，原理是什么？ 我主要是想搞清楚他们反馈的测序结果是那条链的序列。 比如我是用pMD 19-T载体克隆后送测的，我要求正向测序，结果他们用M13F引物测的，那么得到的序列是正义链还是反义链呢？ |
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【答案】应助回帖
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myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2013-12-25 20:55:11
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gyesang: 回帖置顶 2013-12-26 15:12:09
gyesang: MolEPI+1, 回答的很好！ 2013-12-26 15:15:34
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gyesang: 回帖置顶 2013-12-26 15:12:09
gyesang: MolEPI+1, 回答的很好！ 2013-12-26 15:15:34
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1、你的目的片段和PMD-19T载体连接是不定向的 2、测序公司所说的正向和反向是针对载体（如PMD-19T）来说的 3、对于PMD-19T来说，M13F引物所在的那条链即为所谓的正向（正义），M13R为反向（反义） 4、因此，如果你不知道你的目的片段的连接方向如何，那么正向测序结果既也有可能测出你的目的片段是正向也有可能是反向 5、可以用M13F和你的目的片段的反向引物跑PCR检测，如果能跑出片段则为正向连接，如果M13F和你的目的片段正向引物能跑出来，则为反向连接； |
8楼2013-12-25 17:25:08
sarah-miao
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3楼2013-12-25 15:45:27
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4楼2013-12-25 15:48:09
