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柠檬可乐星

新虫 (小有名气)

[求助] 测序公司采用的测序原理是什么? 已有2人参与

各位大虾:知不知道一些测序公司,比如华大、生工、英潍,现在测序一般用的什么技术,原理是什么?
我主要是想搞清楚他们反馈的测序结果是那条链的序列。
比如我是用pMD 19-T载体克隆后送测的,我要求正向测序,结果他们用M13F引物测的,那么得到的序列是正义链还是反义链呢?
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sarah-miao

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
柠檬可乐星: 金币+2 2013-12-26 15:08:28
引用回帖:
6楼: Originally posted by 柠檬可乐星 at 2013-12-25 16:27:02
不是非要得到正义链或是反义链,只是想搞清楚这里边的原理和概念,帮助自己理解。谢谢...

M13f就是19T的上游引物啊,所以测出来的就是正向序列。。。如果是用M13r测序,得到的序列就是反向互补的序列,进行序列分析的时候得reverse的
7楼2013-12-25 16:30:45
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sarah-miao

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香,分子生物期待你更多精彩。 2013-12-25 20:54:59
一般是双脱氧链终止法,M13F得到的是正义链
2楼2013-12-25 15:31:54
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sarah-miao

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

http://blog.sciencenet.cn/blog-757603-679907.html
3楼2013-12-25 15:45:27
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柠檬可乐星

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by sarah-miao at 2013-12-25 15:31:54
一般是双脱氧链终止法,M13F得到的是正义链

您好!还有些问题请教:
我一直把M13F当做上游引物,如果没错的话,就有问题了,今天在网上查,有人说“与mRNA相同的引物为正义引物”,如果他说的是正确的,那么用上游引物测序又怎么能得到正义链呢?
越努力越幸运
4楼2013-12-25 15:48:09
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