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自杀质粒
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各位大虫: 我最近想做自杀质粒的实验,我现在有些困惑向大家请教一下:目前我还没有自杀质粒,需要构建,考虑的转导方式有种:电转和结合转移。(1)若用电转化的话是不是质粒上就没有必要有oriT了,直接找一个普通的大肠窄宿主质粒,加上抗性和同源片段就可以了?其实我不太理解,质粒进去以后会不会被宿主的酶切成碎片,还有就是进行同源重组的时候是什么力量让质粒变成线性的。(2)结合转移,自杀质粒的oriT是不是只有和辅助质粒的oriT一样才能实现转移?用同一个群的其他转移质粒可以吗? |
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haixiawu2楼
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