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赵建雪

银虫 (正式写手)

[求助] 扩未知基因,3“用B26,和B25不知道怎么全是反向引物单引物扩增 已有2人参与

扩未知基因,3”端,用正向引物和B26做一轮PCR,然后用其产物做模板,另一正向引物和B25扩增,为什么所得的片段一直是反向单引物扩增
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自己的路只有自己能负责
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果树研究生

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

我做RACE,5'和3'都没用试剂盒,都能做出来,看了你的B25和B26引物,跟我的一样,自己检查一下你设计的特异引物吧,第一轮PCR产物要稀释50倍作为第二轮PCR的模板;另外提RNA的质量最好高一点。跑个电泳看看。
9楼2014-03-13 16:08:10
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通缉要饭

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
B25和B26是什么?
2楼2013-12-21 18:00:24
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赵建雪

银虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 通缉要饭 at 2013-12-21 18:00:24
B25和B26是什么?

用来扩增尾的引物,B26末尾有一大串B26  gactcgagtcgacatcgattttttttttttttttttB25 GACTCGAGTCGACATCGAT
自己的路只有自己能负责
3楼2013-12-22 20:20:43
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通缉要饭

金虫 (著名写手)

其实我不大理解你的问题,你是用什么试剂盒的啊?
4楼2013-12-22 20:25:26
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