24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 1716  |  回复: 15
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

bb123456789

金虫 (正式写手)


[交流] western boltting技术求救

目前,本人正在做一个目标基因在各个发育时期和某一时期各个组织中的表达情况分析

在DNA水平,做TR-PCR验证在各个组织以及不同的发育时期均表达,但是做western blotting分析时,总没有目标带出来,用同样的抗体对纯化蛋白进行western blotting分析能出来目标带,不知道大家有没有遇到这样的问题?是怎么解决的呢?
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

» 抢金币啦!回帖就可以得到:

查看全部散金贴

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

loveerobin

木虫 (职业作家)


★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
bb123456789: 金币+2, 已经重提过了,效果还是不理想 目前有一些进展了,还在优化条件 2013-12-27 09:43:15
引用回帖:
8楼: Originally posted by bb123456789 at 2013-12-20 09:50:13
目前总蛋白的上样量是100-150ug,一抗稀释按1:7500稀释的,二抗也是按这个比例稀释的  我们的PVDF膜孔径是0.45um,300mA湿转了一个半小时。会不会因为表达量低,转膜的时候转过了呢?...

那就只能是提取蛋白的问题
最好是重提
最坏的可能就是表达量低
16楼2013-12-20 14:00:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 16 个回答

144528

铁虫 (正式写手)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
我不懂,可是我支持!我不懂,可是我支持!我不懂,可是我支持!我不懂,可是我支持!
2楼2013-12-19 23:24:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jinwei331

至尊木虫 (文坛精英)


…………………………
3楼2013-12-19 23:36:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)



bb123456789: 金币+1 2013-12-20 09:44:45
目标蛋白的表达量低,可以增加上样量并减小一抗稀释倍数。
4楼2013-12-20 01:49:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 一志愿华东师范大学有机化学专业,初试351分,复试被刷求调剂! +5 真名有冰 2026-03-29 6/300 2026-03-29 20:53 by 唐沐儿
[考研] 22408 359分调剂 +4 Qshers 2026-03-27 6/300 2026-03-29 14:16 by Qshers
[考研] 348求调剂 +5 小懒虫不懒了 2026-03-28 5/250 2026-03-29 10:34 by 唐沐儿
[考研] 本科双非材料,跨考一志愿华电085801电气,283求调剂,任何专业都可以 +6 芝士雪baoo 2026-03-28 8/400 2026-03-29 08:16 by 松花缸1201
[考研] 329求调剂 +7 星野? 2026-03-26 7/350 2026-03-29 06:43 by 544594351
[考研] 药学105500求调剂 +3 Ssun。。 2026-03-28 3/150 2026-03-28 11:24 by lxf170613
[考研] 266求调剂 +11 阳阳哇塞 2026-03-27 12/600 2026-03-27 17:56 by yu221
[考博] 26申博 +3 加油冲啊! 2026-03-26 3/150 2026-03-27 15:38 by cls512
[考研] 复试调剂,一志愿南农083200食品科学与工程 +5 XQTJZ 2026-03-26 5/250 2026-03-27 14:49 by 狂炫麦当当
[考研] 322求调剂 +4 我真的很想学习 2026-03-23 4/200 2026-03-27 13:51 by 杨杨杨紫
[考研] 一志愿华东理工大学081700,初试分数271 +6 kotoko_ik 2026-03-23 7/350 2026-03-27 12:29 by 惠州彭于晏
[考研] 284求调剂 +11 junqihahaha 2026-03-26 12/600 2026-03-27 04:37 by wxiongid
[考研] 336材料求调剂 +7 陈滢莹 2026-03-26 9/450 2026-03-27 00:20 by wxiongid
[考研] 0703化学求调剂 +3 丹青奶盖 2026-03-26 5/250 2026-03-26 20:11 by macy2011
[考研] 081200-11408-276学硕求调剂 +3 崔wj 2026-03-26 3/150 2026-03-26 19:57 by nihaoar
[考研] 生物学 296 求调剂 +4 朵朵- 2026-03-26 6/300 2026-03-26 19:01 by 不吃魚的貓
[考研] 材料科学与工程 317求调剂 +4 JKSOIID 2026-03-26 4/200 2026-03-26 15:58 by 不吃魚的貓
[考研] 332求调剂 +6 032500 2026-03-25 6/300 2026-03-25 22:45 by 418490947
[考研] 一志愿南航材料专317分求调剂 +5 炸呀炸呀炸薯条 2026-03-23 5/250 2026-03-24 16:52 by 星空星月
[考研] 一志愿吉大化学322求调剂 +4 17501029541 2026-03-23 6/300 2026-03-24 10:21 by 戴围脖的小蚊子
信息提示
请填处理意见