| 查看: 790 | 回复: 8 | |||
lm334723460银虫 (小有名气)
|
[交流]
PCR引物 已有5人参与
|
| 我从文献上找了一对引物，现在要试扩增的程序，退火温度等。我想问下各位是怎么做的。 |
回复此楼» 猜你喜欢
筑牢营养安全线：以精准检测，护健康基石
已经有0人回复
-
推荐一些20种氨基酸检测的实际应用案例
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有130人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：实验器材的 “乌龙”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：和实验材料的 “斗智斗勇”
已经有0人回复
-
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
2楼2013-12-18 22:46:45
3楼2013-12-19 09:49:22
lm334723460
银虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 397.9
- 散金: 1
- 帖子: 64
- 在线: 49.9小时
- 虫号: 2572878
- 注册: 2013-07-30
- 专业: 环境微生物学
4楼2013-12-19 09:51:53
achonghello
金虫 (正式写手)
- 应助: 14 (小学生)
- 金币: 1362.4
- 散金: 190
- 红花: 3
- 帖子: 428
- 在线: 149.8小时
- 虫号: 1117060
- 注册: 2010-10-09
- 专业: 生物化学
5楼2013-12-19 15:39:37
6楼2013-12-19 19:37:02
★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
gyesang: 金币+5, 鼓励回帖交流！ 2014-01-27 20:51:58
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
gyesang: 金币+5, 鼓励回帖交流！ 2014-01-27 20:51:58
|
你要“退火温度等”，你是要摸索PCR的最佳实验条件吗？ 如果是的话： 1.引物Tm值你知道了吧，你使用的taq酶说明书上有建议的退火温度（不同厂家Taq酶的扩增能力、扩增速度、与模板的亲和能力各有不同，所以同一模板不同厂家的酶PCR的退火温度、延伸时间会有差异），你浏览下所使用的Taq酶说明书建议的退火温度（扩增能力强的Taq酶退火温度为Tm值低1-2度，扩增能力差点的为Tm值低5度 等等） 2.TOUCHDOWN摸索退火温度 3.预变性的温度、时间；变性的温度、时间；延伸的温度、时间；这些Taq酶说明书上会有说明，不同牌子的酶会有差异 4.顺便说一句：没有一成不变的退火温度或者延伸时间等等，PCR的条件不仅和引物、模板关系很大，而且与所使用的Taq酶的特点也有很大关系，而很多同学会忽略了所使用的Taq酶的特点 |
7楼2013-12-19 20:02:36
lm334723460
银虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 397.9
- 散金: 1
- 帖子: 64
- 在线: 49.9小时
- 虫号: 2572878
- 注册: 2013-07-30
- 专业: 环境微生物学
8楼2013-12-19 20:55:22
2008101111
金虫 (正式写手)
学术江湖混子
- 应助: 38 (小学生)
- 金币: 1015.6
- 帖子: 385
- 在线: 100.5小时
- 虫号: 604092
- 注册: 2008-09-16
- 性别: GG
- 专业: 食品科学基础
9楼2013-12-22 13:22:30