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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 克隆涂平板37℃培养一夜之后，菌落密密麻麻并且特别小是什么原因？
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柠檬可乐星

新虫 (小有名气)

[交流] 克隆涂平板37℃培养一夜之后，菌落密密麻麻并且特别小是什么原因？

如题，我做克隆，涂完平板之后37℃过夜培养，长出的菌落都是很均一，密度很大，并且特别特别小的，做了两次了，都是这样，请问会是什么原因啊？
（我转化用的感受态是40-50ul，加800ul 不加氨苄的LB培养基或者是SOC，摇菌一个小时，4000rpm 离心1min，移走700ul上清液，第一次是吧剩下的100ul都涂板了，长得菌落太密，第二次用了50ul涂板，用的氨苄是50ug/ml终浓度。两次的摇菌一小时离心完之后都能看到很明显的沉淀，我在想是不是菌液密度太大导致的菌落长不好呢？）
求高手指点，有哪位做这一步效果比较好的，处理方法能告知的将感激不尽！
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1楼 2013-12-18 09:01:22
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r-rainbow

铁虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
如果转化的是质粒就是太浓了 我一般涂50微
如果是连接产物就考虑抗生素的问题 是本来就失效了还是加入的时候太热导致的失效
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13楼2013-12-18 21:48:52
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