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载体与片段连不上
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| 我的目的片段大概2500bp，连接T载体成功，然后用BamHI与kpnI双酶切连在表达载体PKC1139上，就是这一步一直连不上。连T载体的没有问题，T载体双酶切完全，载体由于酶切位点很近，不知道切完全没。分别尝试用T4和 solutionI16℃连接过夜，只加载体片段作为阴性对照，转化大肠杆菌就是转不出来，对照也没有，不知道为什么，求助 |
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