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liyanan2012

铜虫 (初入文坛)

[求助] folin-酚法和凯氏定氮法所测蛋白质的区别,folin-酚法远低于凯氏定氮法已有3人参与

同一种样品,我用folin-酚法所测的蛋白质含量远低于凯氏定氮所测的蛋白质含量,大概少10%,通过查文献知道,第一步是在碱性条件下,蛋白质与二价铜作用生成蛋白质-铜络合物;第二步是此络合物将磷钼酸-磷钨酸试剂(Folin 试剂)还原,产生深蓝色(磷钼蓝和磷钨蓝混合物),颜色深浅与蛋白质含量成正比。我的样品中蛋白质含量在folin-酚法所要求的蛋白质浓度范围内。我想请问大家,凯氏定氮法所得的是总蛋白,那么用folin-酚法所测的蛋白是什么类型的蛋白,比如,可溶性蛋白,游离蛋白,结合蛋白?糖蛋白中与糖结合的蛋白,是否能用folin-酚试剂测出呢?
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baiyan1988

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
2楼: Originally posted by 蓝风腾 at 2013-12-12 08:06:51
凯氏定氮法测的并不是总蛋白,而是总氮,包括核酸、硝酸盐、铵盐等都被换算成了蛋白质,所测含量必然偏高,当年的三聚氰胺就是钻的这个空子。福临酚法测得也不一定是总蛋白,而且干扰物质多,操作麻烦,可以考虑考马 ...

福林酚法不仅能测蛋白质而且游离的单个氨基酸也能使其显色,比如苯丙氨酸、酪氨酸,这个我已经做过实验了。
3楼2014-06-16 15:32:10
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