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王文静341

新虫 (初入文坛)

[求助] HPLC的问题

最近在做HPLC,很想搞明白流动相中加入磷酸缓冲盐的具体作用,知道是调节pH和改善峰型作用,最好结合分子结构、键合相作用力、影响碱性或酸性成分解离作用等这几方面帮忙分析一下,求解答疑惑,感激不尽
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yi_wang

铁杆木虫 (著名写手)

roye

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
采用反相色谱法分离弱酸(3≤pKa≤7)或弱碱(7≤pKa≤8)样品时,通过调节流动相的pH值,以抑制样品组分的解离,增加组分在固定相上的保留,并改善峰形的技术称为反相离子抑制技术。对于弱酸,流动相的pH值越小,组分的k值越大,当pH值远远小于弱酸的pKa值时,弱酸主要以分子形式存在;对弱碱,情况相反。分析弱酸样品时,通常在流动相中加入少量弱酸,常用50mmol/L磷酸盐缓冲液和1%醋酸溶液;分析弱碱样品时,通常在流动相中加入少量弱碱,常用50mmol/L磷酸盐缓冲液和30mmol/L三乙胺溶液。
哥泡的不是论坛,是寂寞....
2楼2013-12-09 13:02:23
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痴夷子皮

版主 (文坛精英)

老痞

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
星海慧儿: 金币+1, 感谢参与,欢迎常来新药版~ 2013-12-09 14:02:27
磷酸缓冲盐,是为了提供离子平衡的反离子,使流动相保持一定的离子强度和pH。
若样品碱性,pH增加,保留时间延长;样品酸性,pH降低,保留时间延长;样品中性,pH几乎没什么影响(原理楼上已阐述)。
守候在风中的宁静。
3楼2013-12-09 13:38:30
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News

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
多看几本书籍你就明白了。论坛里就有资源啊。多淘淘就能淘到金
水滴石穿!!
4楼2013-12-09 14:21:09
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zbgood2009

至尊木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
缓冲盐,主要是离子平衡。
Doyourbest!
5楼2013-12-09 20:31:45
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