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王文静341

新虫 (初入文坛)

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[求助] HPLC的问题

最近在做HPLC，很想搞明白流动相中加入磷酸缓冲盐的具体作用，知道是调节pH和改善峰型作用，最好结合分子结构、键合相作用力、影响碱性或酸性成分解离作用等这几方面帮忙分析一下，求解答疑惑，感激不尽

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潜心学习

1楼 2013-12-09 11:37:39

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yi_wang

铁杆木虫 (著名写手)

roye

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专业: 药物化学

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1

采用反相色谱法分离弱酸（3≤pKa≤7）或弱碱（7≤pKa≤8）样品时，通过调节流动相的pH值，以抑制样品组分的解离，增加组分在固定相上的保留，并改善峰形的技术称为反相离子抑制技术。对于弱酸，流动相的pH值越小，组分的k值越大，当pH值远远小于弱酸的pKa值时，弱酸主要以分子形式存在；对弱碱，情况相反。分析弱酸样品时，通常在流动相中加入少量弱酸，常用50mmol/L磷酸盐缓冲液和1%醋酸溶液；分析弱碱样品时，通常在流动相中加入少量弱碱，常用50mmol/L磷酸盐缓冲液和30mmol/L三乙胺溶液。