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leezz

铜虫 (小有名气)

愤青

[求助] 蛋白抽滤和过膜包出现浑浊和明显的沉淀

各路大神大家好:小弟在此拜过,最近一事不顺,在蛋白质纯化结束后,因为浓度低的问题,所以考虑过膜包浓缩,但在这过程中出现了相当明显的浑浊和沉淀现象。蛋白起始浓度1mg/ml-3mg/ml,Buffer:PB(6.5-7.0)。请问大家怎么能比较好的解决这个问题,谢谢。
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dabao436

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
河边的芦苇: 金币+1, 感谢回帖交流 2013-12-09 18:05:45
leezz: 金币+10 2013-12-14 14:55:38
buffer PH值不能太接近蛋白PI值
温度控制在4℃左右
浓缩速度不要过快(容易局部浓度过高导致沉淀)
buffer里可以适当增加些甘油(10%左右)
如果还有沉淀那就是你的蛋白本身就不稳定
6楼2013-12-09 14:51:53
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pch1967

铜虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
leezz: 金币+10 2013-12-02 20:57:14
蛋白抽滤和过膜包的压力要小点,可以防止出现浑浊和沉淀。
2楼2013-12-02 06:59:35
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pch1967

铜虫 (正式写手)

蛋白抽滤速度不要太快。
3楼2013-12-02 07:01:46
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liulion2008

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
膜是不是有问题?
4楼2013-12-02 08:26:29
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