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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药品生产 » 生产技术 » 蛋白抽滤和过膜包出现浑浊和明显的沉淀
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leezz

铜虫 (小有名气)

愤青

[求助] 蛋白抽滤和过膜包出现浑浊和明显的沉淀

各路大神大家好：小弟在此拜过，最近一事不顺，在蛋白质纯化结束后，因为浓度低的问题，所以考虑过膜包浓缩，但在这过程中出现了相当明显的浑浊和沉淀现象。蛋白起始浓度1mg/ml-3mg/ml，Buffer：PB（6.5-7.0）。请问大家怎么能比较好的解决这个问题，谢谢。
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1楼 2013-12-01 18:24:18
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pch1967

铜虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
leezz: 金币+10 2013-12-02 20:57:14
蛋白抽滤和过膜包的压力要小点，可以防止出现浑浊和沉淀。
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2楼2013-12-02 06:59:35
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pch1967

铜虫 (正式写手)
蛋白抽滤速度不要太快。
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3楼2013-12-02 07:01:46
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liulion2008

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
膜是不是有问题？
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4楼2013-12-02 08:26:29
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yi_wang

铁杆木虫 (著名写手)

roye

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
leezz: 金币+10 2013-12-02 20:57:47
蛋白抽滤和过膜速度不能太快，要不容易出现析出而变浑浊、沉淀。
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哥泡的不是论坛,是寂寞....
5楼2013-12-02 14:48:32
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dabao436

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
河边的芦苇: 金币+1, 感谢回帖交流 2013-12-09 18:05:45
leezz: 金币+10 2013-12-14 14:55:38
buffer PH值不能太接近蛋白PI值
温度控制在4℃左右
浓缩速度不要过快（容易局部浓度过高导致沉淀）
buffer里可以适当增加些甘油（10%左右）
如果还有沉淀那就是你的蛋白本身就不稳定
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6楼2013-12-09 14:51:53
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