24小时热门版块排行榜    

查看: 1923  |  回复: 10

fluffylee

铜虫 (小有名气)

[求助] 在做一个和official method对比的方法验证实验,关于method validation的问题

想请教各位牛牛,我目前在做一个和official method比较看我的方法是不是更省时同时也很准确的实验。其中涉及到的物质有脱镁叶绿素a (pheophytin a)和原焦脱镁叶绿酸a(pyropheophytin a)(不知道中文翻得对不对。。),是算他们的比例。
由于是方法比较的验证性实验,所以要测LOD, LOQ, method accuracy, method precision等一系列的值,但是pyropheopytin a很难制得,我做method validation的时候是不是可以只用pheophytin a 一种standard呢?是不是有个原则是只要物质结构相似就可以只用一个物质的standard validate method?

另:有人用chlorophyll a制作过pheophytin a吗?我搜了些paper,都没有说得很清楚怎么做的。希望知道的筒子可以丢个paper或者method过来~

非常感谢!
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yjlrx

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
release53: 金币+1, 感谢交流 2013-11-24 17:08:19
专属性,线性,溶液稳定性肯定是不能相似物质代替,LOD,LOQ好像也不行,要算峰高的,系统精密度,方法精密度,中间精密度可以,但是要算出两种物质的相对相应因子。准确度不用做,因为对于你的方法,线性和精密度过了就可以推论出你的准确度也是过的,ICH里有这句话。
还有你说是比较性验证,是什么意思,能具体点么?大家讨论一下~~~
2楼2013-11-22 21:48:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yjlrx

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

你的意思是不是你有个更优化的方法,然后验证这个方法。
3楼2013-11-22 21:56:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fluffylee

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by yjlrx at 2013-11-22 21:56:17
你的意思是不是你有个更优化的方法,然后验证这个方法。

谢谢回复哈~
就是测橄榄油中的pyropheophytin a(PPP)含量,是一个比较好的看thermal degradation的指标。IOC已经有一个certified的方法,最后用HPLC-DAD检测的,但是步骤比较多,还要用到SPE。我的方法是不需要任何准备实验,直接进样的。目前还在设计实验阶段。想说取40个油样,20个PPP较低的,20个PPP较高的,然后用传统方法做一遍,再用我的新方法做一遍,看看结果是不是大概一致,然后验证一下HPLC的方法。不知道这样设计实验是不是ok~想发paper的
4楼2013-11-23 01:38:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fluffylee

铜虫 (小有名气)

我之前找到一篇paper里说做pheophytin a的方法,贴上来请大家帮忙看看。黄色高亮的那部分我实在不明白到底是如何得到pheophytin a的浓度47.2mg/L的。。。
而且高亮之前那句Thereafter, acetone:water was added and the diethyl ether was evaporated under nitrogen是指之前在chl a stock solution里一起带过来的acetone:water么?之后和diethyl ether一起被蒸发么?还是要另外加acetone:water?也没说加多少啊。。是加到和stock solution一样多,也就是100mL么?
谢谢大家了>.<

» 本帖附件资源列表

5楼2013-11-23 01:53:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yjlrx

金虫 (小有名气)

呵呵,我也没看懂,问题和你一样。
有木有人懂得啊~~~
6楼2013-11-23 23:28:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

niezher

木虫 (小有名气)

method accuracy 怎么评价呢?
7楼2013-11-25 00:04:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fluffylee

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by yjlrx at 2013-11-23 23:28:44
呵呵,我也没看懂,问题和你一样。
有木有人懂得啊~~~

你真帮我看啦~谢谢谢谢~我让我教授也看了他也没看懂。。。我打算直接去买STD了。。。
话说method validation有一个方法是comparison to a certified method:if you are conducting an analysis for a routine analyte for which there are certified methods available, then you can compare the results obtained by your method to the results obtained from the certified method.
但是我的实验是为了说明我这个方法和certified method做出来的结论comparable,不知道是不是还需要STD来从头验证method呢?
8楼2013-11-25 10:00:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fluffylee

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
7楼: Originally posted by niezher at 2013-11-25 00:04:17
method accuracy 怎么评价呢?

一般都算recovery吧~
9楼2013-11-25 10:02:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yjlrx

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
8楼: Originally posted by fluffylee at 2013-11-25 10:00:32
你真帮我看啦~谢谢谢谢~我让我教授也看了他也没看懂。。。我打算直接去买STD了。。。
话说method validation有一个方法是comparison to a certified method:if you are conducting an analysis for a routine an ...

要从头验证的,但是要把两个方法的比较加进去。
10楼2013-11-25 10:40:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 fluffylee 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 国社科又开始会评了,不知道这次命运如何 +9 雨打竹帘 2026-08-30 13/650 2026-09-03 08:16 by kudofaye
[基金申请] 麻烦专家们看看评委们的意见(F口面上) +8 gdd2018 2026-08-28 13/650 2026-09-03 06:22 by 羽毛枫f
[公派出国] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 ero8OE6tv9cu 2026-09-02 4/200 2026-09-03 03:14 by rM1TE0WVDIIY
[博后之家] 售SCI文章,我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 ero8OE6tv9cu 2026-09-02 6/300 2026-09-02 23:59 by rM1TE0WVDIIY
[基金申请] 为什么资助数各大高校都创新高,自己申请怎么就这么难 +14 Kittylucky 2026-08-27 15/750 2026-09-02 19:35 by liumei0601
[基金申请] 科研人应该花精力去思考如何解决问题,而不是去凝练问题 +7 瞬息宇宙 2026-09-01 14/700 2026-09-02 17:33 by ma0526
[基金申请] 要骂人了,新模版改版就是要淡化问题凝练这种虚的东西,结果有个评委还在说凝练得不够 +9 瞬息宇宙 2026-08-31 17/850 2026-09-02 14:04 by anjeeshine
[基金申请] 基金系统什么内容也没有 30+4 winsaint 2026-08-27 10/500 2026-09-02 11:35 by 大不刘6
[基金申请] 学科评审组评审是指会评吗? +5 瞬息宇宙 2026-08-31 5/250 2026-09-02 10:13 by 雨冰共舞
[基金申请] 面上函评意见出来了,像什么等级? 20+4 Tsingking1 2026-08-27 17/850 2026-09-01 19:51 by 超级无敌华子
[论文投稿] 小白求助 投论文要求的highlights应该如何写 5+3 l1963982152 2026-08-29 4/200 2026-09-01 09:04 by 北京莱茵编辑
[基金申请] 基金未中,这种答复是模板吗? +6 zhaosm1982 2026-08-27 7/350 2026-08-31 21:18 by qdxxmc
[基金申请] 面上意见出来了 +12 黄鸟于飞Chao 2026-08-29 23/1150 2026-08-31 18:57 by 黄鸟于飞Chao
[基金申请] 能否申诉? +7 echo8914667 2026-08-30 8/400 2026-08-31 17:00 by yihongxu
[基金申请] 中青基了要发朋友圈吗? +7 349506619 2026-08-28 7/350 2026-08-31 13:39 by 冼亮淀粉酶
[基金申请] 29号明天会评吗 +4 笨笨唐 2026-08-28 4/200 2026-08-31 09:30 by huixian257
[基金申请] 为什么到现在没收到通知? +5 tannykie 2026-08-29 5/250 2026-08-30 21:05 by purplejack
[考博] 找导师 +6 yuanjiabao 2026-08-29 7/350 2026-08-30 14:40 by 生科新手
[基金申请] 我就是申请一个面上项目而已,这评审意见是按照杰青的条件评的吧? +6 gouxfjh 2026-08-28 11/550 2026-08-30 07:57 by gouxfjh
[基金申请] 国自然评审意见 +13 wangmingqi 2026-08-28 19/950 2026-08-29 10:22 by Poppy1104
信息提示
请填处理意见