24小时热门版块排行榜    

查看: 1092  |  回复: 6

Carnity

新虫 (正式写手)

[求助] ORF两翼区序列的获得方法

请教一下各位虫友,如果我知道某个基因的ORF序列,但是我想知道它的两翼区序列,我该怎么做?
最近使用了Genome Walking以及inverse PCR两种方法,但是获得的序列都不理想,不知道还有没有其他的什么好点的方法可以参考。
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gyesang

荣誉版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你是想知道这个ORF两侧的基因组序列还是cDNA5‘和3’UTR序列,如果是后者的话,可以做5‘和3’RACE
学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com
2楼2013-11-22 16:46:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Carnity

新虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by gyesang at 2013-11-22 16:46:49
你是想知道这个ORF两侧的基因组序列还是cDNA5‘和3’UTR序列,如果是后者的话,可以做5‘和3’RACE

想获得基因组层次的数据,不是mRNA的
3楼2013-11-25 11:21:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

不叶珏

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励交流! 2013-11-25 13:18:46
gyesang: 回帖置顶 2013-11-25 13:18:47
Genome Walking以及inverse PCR 就能解决你的问题 但是挑单克隆比较麻烦 要挑个好的酶 看人品
借你一生好不好
4楼2013-11-25 11:52:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Carnity

新虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 不叶珏 at 2013-11-25 11:52:20
Genome Walking以及inverse PCR 就能解决你的问题 但是挑单克隆比较麻烦 要挑个好的酶 看人品

最近就在做着walking和iPCR,进展太慢,我又不能跟老板说这个得看人品……
5楼2013-11-26 11:54:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

不叶珏

铁杆木虫 (正式写手)

引用回帖:
5楼: Originally posted by Carnity at 2013-11-26 11:54:59
最近就在做着walking和iPCR,进展太慢,我又不能跟老板说这个得看人品……...

那你只能同时做很多了
用很多种限制酶 酶切
挑菌的时候尽量多挑一些菌
借你一生好不好
6楼2013-11-26 13:44:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

blackrose8089

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

引用回帖:
5楼: Originally posted by Carnity at 2013-11-26 11:54:59
最近就在做着walking和iPCR,进展太慢,我又不能跟老板说这个得看人品……...

Genome walking,TAILPCR方法可以搞定的吧?
jiayoubashaonian
7楼2013-11-26 16:18:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 Carnity 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 今天系统多次维护,明天很可能放榜! +6 zju2000 2026-08-16 6/300 2026-08-17 10:01 by xter9665
[教师之家] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 6GojgJvkDudM 2026-08-16 3/150 2026-08-17 09:49 by xLVPIRuSvCUe
[基金申请] 欢迎发来filecode的Mz6后的代码验证其规律 +32 医学老男孩 2026-08-13 74/3700 2026-08-16 21:05 by 医学老男孩
[论文投稿] 岩土工程学报什么时候才能终审完呐 25+3 yeager111 2026-08-10 4/200 2026-08-16 20:42 by tfang
[基金申请] 时间戳又变了8-15 +13 archvillain 2026-08-15 25/1250 2026-08-16 20:13 by zhaosm1982
[基金申请] 2027广东省杰青 +3 奶牛小黑 2026-08-15 6/300 2026-08-16 20:07 by 奶牛小黑
[基金申请] 咱们一起用铁证分析2026国家社科基金中标与否 +7 启萌科技 2026-08-12 26/1300 2026-08-16 12:35 by 启萌科技
[基金申请] 我的国基提前知道中了,可是同事的操作让我实在接受不了,怎么会有这样的人 +11 家与远方 2026-08-10 16/800 2026-08-16 10:28 by ray43
[基金申请] 有时候,自然基金真的不能太认真 (我的申报经验) +10 majunge000 2026-08-11 12/600 2026-08-16 08:18 by xli1984
[基金申请] filecode=后面第一个是大写字母 +6 wangze12014 2026-08-14 7/350 2026-08-15 20:12 by gltch
[基金申请] 关于Filecode分析方法 +10 majunge000 2026-08-10 13/650 2026-08-15 12:26 by hanpeng972
[硕博家园] 读博的好处 +4 lnee 2026-08-11 4/200 2026-08-14 10:20 by ahsoarli
[基金申请] filecode +15 documentary 2026-08-10 17/850 2026-08-14 10:08 by kissu88
[基金申请] 重要来源:本周末出结果 +10 瞬息宇宙 2026-08-12 10/500 2026-08-13 15:46 by likettle
[基金申请] 不应该看fileCode +7 且听虎啸 2026-08-12 9/450 2026-08-13 14:27 by flydreamws
[基金申请] 分享一下我之前已中青C的计划书的filecode +4 布布和一二 2026-08-11 5/250 2026-08-13 12:56 by cratir
[基金申请] 帮忙看看fileCode +7 wwncly 2026-08-10 13/650 2026-08-11 19:36 by 冰心玉壶晴
[基金申请] 为什么网上很多人说本周 12号出结果 +6 瞬息宇宙 2026-08-10 7/350 2026-08-11 19:25 by Tide man
[基金申请] 什么时候出结果,有咨询渠道??? +3 Tide man 2026-08-11 3/150 2026-08-11 17:54 by kudofaye
[基金申请] 确定了,国自然21号放榜 +6 布布和一二 2026-08-10 7/350 2026-08-10 19:15 by 2000zf36392
信息提示
请填处理意见