24小时热门版块排行榜    

查看: 1141  |  回复: 6

Carnity

新虫 (正式写手)

[求助] ORF两翼区序列的获得方法

请教一下各位虫友,如果我知道某个基因的ORF序列,但是我想知道它的两翼区序列,我该怎么做?
最近使用了Genome Walking以及inverse PCR两种方法,但是获得的序列都不理想,不知道还有没有其他的什么好点的方法可以参考。
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖置顶 ( 共有1个 )

不叶珏

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励交流! 2013-11-25 13:18:46
gyesang: 回帖置顶 2013-11-25 13:18:47
Genome Walking以及inverse PCR 就能解决你的问题 但是挑单克隆比较麻烦 要挑个好的酶 看人品
借你一生好不好
4楼2013-11-25 11:52:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

gyesang

荣誉版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你是想知道这个ORF两侧的基因组序列还是cDNA5‘和3’UTR序列,如果是后者的话,可以做5‘和3’RACE
学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com
2楼2013-11-22 16:46:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Carnity

新虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by gyesang at 2013-11-22 16:46:49
你是想知道这个ORF两侧的基因组序列还是cDNA5‘和3’UTR序列,如果是后者的话,可以做5‘和3’RACE

想获得基因组层次的数据,不是mRNA的
3楼2013-11-25 11:21:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Carnity

新虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 不叶珏 at 2013-11-25 11:52:20
Genome Walking以及inverse PCR 就能解决你的问题 但是挑单克隆比较麻烦 要挑个好的酶 看人品

最近就在做着walking和iPCR,进展太慢,我又不能跟老板说这个得看人品……
5楼2013-11-26 11:54:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

不叶珏

铁杆木虫 (正式写手)

引用回帖:
5楼: Originally posted by Carnity at 2013-11-26 11:54:59
最近就在做着walking和iPCR,进展太慢,我又不能跟老板说这个得看人品……...

那你只能同时做很多了
用很多种限制酶 酶切
挑菌的时候尽量多挑一些菌
借你一生好不好
6楼2013-11-26 13:44:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

blackrose8089

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

引用回帖:
5楼: Originally posted by Carnity at 2013-11-26 11:54:59
最近就在做着walking和iPCR,进展太慢,我又不能跟老板说这个得看人品……...

Genome walking,TAILPCR方法可以搞定的吧?
jiayoubashaonian
7楼2013-11-26 16:18:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 Carnity 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考博] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 C79jjtjAKjEn 2026-09-15 3/150 2026-09-18 03:42 by cITaGg3p5edr
[硕博家园] 售SCI一区文章,我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 mibUvS8DDCwf 2026-09-15 3/150 2026-09-18 03:04 by cITaGg3p5edr
[公派出国] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 vZfe6xYu34yj 2026-09-14 3/150 2026-09-18 02:30 by cITaGg3p5edr
[公派出国] 售SCI文章,我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 vZfe6xYu34yj 2026-09-14 3/150 2026-09-18 02:06 by cITaGg3p5edr
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +4 Aj1rhIDL5ixY 2026-09-14 4/200 2026-09-18 01:54 by cITaGg3p5edr
[找工作] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +6 s3fFTmArrBt6 2026-09-13 6/300 2026-09-17 23:28 by cuPZTDXS3VOd
[找工作] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +7 s3fFTmArrBt6 2026-09-13 8/400 2026-09-17 23:28 by cuPZTDXS3VOd
[考博] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +4 s3fFTmArrBt6 2026-09-13 6/300 2026-09-17 23:16 by cuPZTDXS3VOd
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +5 23jxep3nCNZb 2026-09-14 5/250 2026-09-17 13:53 by ObVzqQQh1rrE
[找工作] 售SCI一区文章,我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +8 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 8/400 2026-09-17 11:27 by UAIjTRMuUFoj
[考研] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 6F5UbRU2I5hL 2026-09-14 5/250 2026-09-17 03:14 by Tql5LQhh5rLK
[找工作] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +3 s3fFTmArrBt6 2026-09-14 3/150 2026-09-17 02:38 by Tql5LQhh5rLK
[公派出国] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +5 s3fFTmArrBt6 2026-09-13 7/350 2026-09-17 02:14 by Tql5LQhh5rLK
[考博] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 6F5UbRU2I5hL 2026-09-14 4/200 2026-09-16 17:00 by i3KBRD19ERkG
[考博] 售SCI文章,我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +7 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 7/350 2026-09-16 14:36 by i3KBRD19ERkG
[找工作] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +4 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 6/300 2026-09-16 14:27 by i3KBRD19ERkG
[找工作] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +7 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 8/400 2026-09-16 02:23 by DgNGHc3h5tPl
[考博] 售SCI一区文章,我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +7 s3fFTmArrBt6 2026-09-14 7/350 2026-09-15 16:23 by CgyNCDVNhGVg
[教师之家] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +4 s3fFTmArrBt6 2026-09-13 4/200 2026-09-15 06:50 by 5BDX0d0WFp7t
[教师之家] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +6 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 6/300 2026-09-15 05:38 by 5BDX0d0WFp7t
信息提示
请填处理意见