24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 1044  |  回复: 10
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

风吹我已散

木虫 (正式写手)


[交流] 酶切问题

在19T上连了一个目的片段(大概1.6K),挑单克隆菌落培养,分别pcr和酶切验证目的片段在19T上的插入方向。根据我的目的基因的序列,选择了xbal酶切,该酶切位点在我的目的片段大概1.2K左右的位置上,也就是说如果是正向插入的话,酶切下来应该是3.9K和400bp的条带;反向插入的应该是1.2K和3.1k左右的条带。通过载体上的引物和我扩目的片段的引物pcr验证出了正向和反向插入(有正负对照);但是酶切只能验证反向插入的(有1.2K和3.1k左右的条带),而正向插入的无400bp的条带。这个怎么解释?胶我试过1.5%和1.2%的,都没有。求帮助。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 抢金币啦!回帖就可以得到:

查看全部散金贴

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

风吹我已散

木虫 (正式写手)


引用回帖:
2楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-11-22 11:22:00
酶切出来的小片段在胶上比较暗。增加点样量,应该可以看到的。

我试试看哈。
3楼2013-11-22 13:08:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 11 个回答

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)


★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
风吹我已散: 金币+1 2013-11-22 13:08:18
gyesang: 金币+2, 鼓励交流! 2013-11-22 16:23:44
酶切出来的小片段在胶上比较暗。增加点样量,应该可以看到的。
2楼2013-11-22 11:22:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zh10246

铁杆木虫 (文坛精英)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
你的目的是什么,表达还是测序,最好的方法就是测序
4楼2013-11-22 14:09:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

风吹我已散

木虫 (正式写手)


引用回帖:
4楼: Originally posted by zh10246 at 2013-11-22 14:09:43
你的目的是什么,表达还是测序,最好的方法就是测序

以后要表达;老师说,先不用测序,pcr,酶切做了再说。
5楼2013-11-22 14:12:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 一志愿211,335分,0856,求调剂院校和导师 +5 倾____萧 2026-03-27 6/300 2026-03-29 16:35 by 唐沐儿
[考研] 299求调剂 +9 15188958825 2026-03-25 9/450 2026-03-29 14:16 by wxiongid
[考研] 求收留 +5 1943443204 2026-03-28 5/250 2026-03-29 12:11 by 无际的草原
[考研] 322求调剂 +7 宋明欣 2026-03-27 7/350 2026-03-28 21:27 by sanrepian
[考研] 332求调剂 +4 @MZB382400 2026-03-28 4/200 2026-03-28 21:02 by 唐沐儿
[考研] 343求调剂 +5 爱羁绊 2026-03-28 5/250 2026-03-28 20:53 by 唐沐儿
[考研] 071000生物学求调剂,初试成绩343 +7 小小甜面团 2026-03-25 7/350 2026-03-28 20:25 by 唐沐儿
[考研] 346求调剂 一志愿070303有机化学 +3 萝卜炖青菜 2026-03-28 3/150 2026-03-28 14:11 by 唐沐儿
[考研] 一志愿南昌大学324求调剂 +7 hanamiko 2026-03-27 7/350 2026-03-28 09:56 by 李上岸0921
[考研] 340求调剂 +5 jhx777 2026-03-27 5/250 2026-03-28 04:18 by fmesaito
[考研] 331环境科学与工程求调剂 +3 熠然好运气 2026-03-27 3/150 2026-03-28 04:11 by fmesaito
[考研] 266求调剂 +11 阳阳哇塞 2026-03-27 12/600 2026-03-27 17:56 by yu221
[考研] 085601 材料工程 313分 求调剂 +5 Ong3 2026-03-27 5/250 2026-03-27 12:24 by goldfish51
[考研] 341求调剂 +7 青柠檬1 2026-03-26 7/350 2026-03-27 00:19 by wxiongid
[考研] 求调剂 一志愿 本科 北科大 化学 343 +6 13831862839 2026-03-24 7/350 2026-03-26 22:57 by 不吃魚的貓
[考研] 325求调剂 +3 Aoyijiang 2026-03-23 3/150 2026-03-26 20:46 by 不吃魚的貓
[考研] 生物学 296 求调剂 +4 朵朵- 2026-03-26 6/300 2026-03-26 19:01 by 不吃魚的貓
[考研] 309求调剂 +4 gajsj 2026-03-25 5/250 2026-03-26 00:27 by Dyhoer
[考研] 材料考研调剂生 +3 黄粱一梦千年 2026-03-24 3/150 2026-03-24 17:00 by barlinike
[考研] 070300,一志愿北航320求调剂 +3 Jerry0216 2026-03-22 5/250 2026-03-23 09:16 by 。。堂堂
信息提示
请填处理意见