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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 有没有T-simple载体，可区分2.6k片段
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kinsuo

铜虫 (初入文坛)

[求助] 有没有T-simple载体，可区分2.6k片段

最近在连一个2.6k的片段，但是takara的T-Simple也正好是2.6k左右。想问问大家谁用过其他的T-Simple，连接效率较高，假阳性较少的，关键是回收时，能区分开这个2.6k的片段。

[ Last edited by kinsuo on 2013-11-22 at 10:23 ]
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1楼 2013-11-22 10:21:36
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励交流！ 2013-11-22 13:01:41
查一下载体的酶切位点，选一个目的片段上没有的，把载体切碎后可以胶回收目的片段。
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2楼2013-11-22 11:31:36
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maria229

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
全式金的T1 simple，3.8k，很好用的
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3楼2013-11-22 13:15:49
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kinsuo

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-11-22 11:31:36
查一下载体的酶切位点，选一个目的片段上没有的，把载体切碎后可以胶回收目的片段。

因为我要构建质粒文库，所以片段较复杂，载体上的酶切位点不太好找，而且这个酶切位点至少要距离插入片段两端的酶切位点300bp以上才能区分开。对我来说换载体是最方便的，但是就是找不到好用的其他大小的T-Simple。。。
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4楼2013-11-25 10:30:03
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kinsuo

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by maria229 at 2013-11-22 13:15:49
全式金的T1 simple，3.8k，很好用的

多谢建议。用过了，不好用，全是空载自连的，还是想找连接效率和阳性率高的
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5楼2013-11-25 10:32:21
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huahu3600

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

promega  Teasy  3.0kb
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6楼2013-11-25 16:05:20
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kinsuo

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by huahu3600 at 2013-11-25 16:05:20
promega  Teasy  3.0kb

多谢，但我看了下，发现这个easy不是easy啊,上面还是有一些常用的酶切位点，NotI。。。
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7楼2013-11-26 08:59:21
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blackrose8089

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

引用回帖:
5楼: Originally posted by kinsuo at 2013-11-25 10:32:21
多谢建议。用过了，不好用，全是空载自连的，还是想找连接效率和阳性率高的...

这个挺好用的吧，我们也用过，大小不等的均能连进去
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jiayoubashaonian
8楼2013-11-26 15:57:32
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