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baicai1487

铁虫 (小有名气)

[求助] 急,急,急!关于除盐的问题

各位大侠,本人最近遇到些难题
1 透析用0.01mol/lPBS透析之后,冻干成粉,测粉末中蛋白的纯度,不知道怎么扣除PBS的量,扣了也不准吧
2 用水透析出现大量沉淀,蛋白损失量多,而PBS透析没有沉淀,但纯度不知道怎么算
3 用G25脱盐,发现盐峰下出现蛋白吸收峰,做电泳有蛋白条带
4 蛋白除盐之后还稳定吗,我是用PBS提的,除盐之后就是蛋白水溶液,稳点吗
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baicai1487

铁虫 (小有名气)


137167741: 金币+1, 小木虫交流,共同进步~~ 2013-11-29 08:45:49
不相关呀,没有解决问题呀
2楼2013-11-21 12:55:28
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baodongq

禁虫 (正式写手)

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
137167741: 金币+2, 小木虫交流,共同进步~~ 2013-11-29 08:46:04
本帖内容被屏蔽

3楼2013-11-22 10:22:55
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baicai1487

铁虫 (小有名气)


137167741: 金币+1, 小木虫交流,共同进步~~ 2013-11-29 08:46:10
内容已删除
4楼2013-11-22 10:49:21
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baodongq

禁虫 (正式写手)


137167741: 金币+1, 小木虫交流,共同进步~~ 2013-11-29 08:46:18
本帖内容被屏蔽

5楼2013-11-22 11:02:21
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同东中郎将

新虫 (小有名气)


137167741: 金币+1, 小木虫交流,共同进步~~ 2013-11-29 08:46:24
引用回帖:
4楼: Originally posted by baicai1487 at 2013-11-22 10:49:21
我是蛋白透析后冻干成粉,要是用缓冲盐透析的话,缓冲盐肯定还在蛋白里面,那么纯度肯定少,我做过水透析和PBS透析的比较,发现PBS透析的蛋白纯度只有40%而水透析则有60%...

如果你的蛋白浓度低的话,可以先超滤浓缩一下蛋白,浓缩只浓缩蛋白,不浓缩盐分,这样你冻干后的蛋白比例会高一点吧。
曾子曰:“士不可以不弘毅,任重而道远。仁以为己任,不亦重乎?死而后已,不亦远乎?”
6楼2013-11-22 11:10:04
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baicai1487

铁虫 (小有名气)


137167741: 金币+1, 小木虫交流,共同进步~~ 2013-11-29 08:46:31
内容已删除
7楼2013-11-22 18:23:52
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baicai1487

铁虫 (小有名气)


137167741: 金币+1, 小木虫交流,共同进步~~ 2013-11-29 08:46:37
引用回帖:
6楼: Originally posted by 同东中郎将 at 2013-11-22 11:10:04
如果你的蛋白浓度低的话,可以先超滤浓缩一下蛋白,浓缩只浓缩蛋白,不浓缩盐分,这样你冻干后的蛋白比例会高一点吧。...

浓缩还是不能解决蛋白的纯度问题,杂质还是在的,冻干就是浓缩的意思吧,把水都冻干
8楼2013-11-22 18:27:03
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baicai1487

铁虫 (小有名气)


137167741: 金币+1, 小木虫交流,共同进步~~ 2013-11-29 08:46:43
内容已删除
9楼2013-11-28 10:39:18
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baodongq

禁虫 (正式写手)

★ ★
137167741: 金币+2, 鼓励交流~~ 2013-11-29 08:46:51
本帖内容被屏蔽

10楼2013-11-28 14:53:39
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