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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 大家帮忙看下我的杂交图（southern blot 图）到底问题出在哪里？
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忘忧草_

木虫 (正式写手)

[求助] 大家帮忙看下我的杂交图（southern blot 图）到底问题出在哪里？ 已有4人参与

植物基因组经过A/B/A+B 两种酶进行酶切，做southern杂交，用的罗氏的地高辛试剂盒，好像是背景很高，掩盖了目的条带，请大家帮忙分析一下啊？可能是什么问题，不胜感激！（M:marker   1：A酶切     2：B酶切    3：A+B酶切)
大家帮忙看下我的杂交图（southern blot 图）到底问题出在哪里？
无标题.jpg
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不将就
1楼 2013-11-20 15:13:32
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freezhangp

木虫 (知名作家)
帮顶
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你必须非常努力才能看起来毫不费力
2楼2013-11-20 15:41:17
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忘忧草_

木虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by freezhangp at 2013-11-20 15:41:17
帮顶

谢了！
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不将就
3楼2013-11-20 18:18:38
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xjldemon

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
忘忧草_: 金币+20, ★★★很有帮助, 谢谢您了，终于有人回复哇了 2013-12-20 08:58:00
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2014-01-29 16:25:04
预杂交时间加长，过夜都没关系，越长背景越白，1.2的DNA量少了。maker可以少加点，maker的DNA很纯，所以即使少，最终显色的时候也很亮
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4楼2013-12-19 15:38:34
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jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
忘忧草_: 金币+5, ★★★很有帮助, 我这个是硝酸纤维素膜啊 2013-12-27 12:27:47
忘忧草_(myprayer代发): 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2014-04-30 11:47:29
尼龙膜就是背景高
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5楼2013-12-27 10:23:14
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mdzgood123

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2014-04-30 11:47:19
你的预杂交时间不是很长也没关系，在对膜进行处理，洗的时候可以适当的延长时间，我做的都是预杂交30分钟，背景都很白。
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6楼2014-04-29 20:43:40
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shuangyin

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

一般来说maker的背景不应该比样品的背景高这么多的，因为maker的上样量是很少的。你这里样品的背景远远低于maker的背景，相对来说并不能单纯的说背景高
背景跟显色时间有关，可能你没看到目的条带，就增加显色时间，背景当然高了。会不会是其他环节的问题？
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7楼2014-08-30 09:50:02
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