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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 菌液保存
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wanghf_6134

新虫 (初入文坛)

[求助] 菌液保存

蓝白斑培养，摇好的菌液怎么保存呢？查资料说离心沉淀加甘油冷冻，难么具体要怎么做呢？离心后要去掉上清液吗？甘油要杀菌吗？大家有什么好的方法，全一点，多谢啦

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1楼 2013-11-20 13:03:12
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cl_0912

新虫 (初入文坛)
★
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2013-11-20 17:56:56
我们实验室保存菌液是用80%的甘油，甘油要灭菌两次，中间隔一天，然后保存冻存管，我一般是700微升菌液700微升甘油，摇匀后就可以放—20度冰箱了

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2楼2013-11-20 13:15:59
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cl_0912

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
我们实验室保存菌液是用80%的甘油，甘油要灭菌两次，中间隔一天，然后保存冻存管，我一般是700微升菌液700微升甘油，摇匀后就可以放—20度冰箱了

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3楼2013-11-20 13:16:52
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★
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myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2013-11-20 17:57:13
一般菌液不用离心，摇过夜的菌液（OD600通常高于2）直接加灭菌甘油至甘油的终浓度为15-20%，混匀后冻存。100%的甘油太粘稠，不好吸。一般是用水稀释成50%或者80%，高压灭菌。
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4楼2013-11-20 13:43:30
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wang23212

银虫 (小有名气)

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★
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myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2013-11-20 17:57:23
配50%的甘油溶液  灭菌
保存时取500微菌液与500微50%甘油混合 然后-20保存
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5楼2013-11-20 15:04:47
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wanghf_6134

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by wang23212 at 2013-11-20 15:04:47
配50%的甘油溶液  灭菌
保存时取500微菌液与500微50%甘油混合 然后-20保存

不用沉淀吗？那这样能保存多久？
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6楼2013-11-20 19:06:13
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wanghf_6134

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by cl_0912 at 2013-11-20 13:16:52
我们实验室保存菌液是用80%的甘油，甘油要灭菌两次，中间隔一天，然后保存冻存管，我一般是700微升菌液700微升甘油，摇匀后就可以放—20度冰箱了

灭菌两次后，为什么要隔一天，有讲究吗？还有配好的甘油放-20℃吗
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7楼2013-11-20 19:38:07
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junziwood

新虫 (小有名气)

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200ul菌液+800ul的80%甘油，-20或-80冻存就可以了吧
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8楼2013-11-20 21:45:21
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wang23212

银虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by wanghf_6134 at 2013-11-20 19:06:13
不用沉淀吗？那这样能保存多久？...

一个月左右 如果长时间不用就放-80
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9楼2013-11-21 10:02:39
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zhghlj

新虫 (小有名气)

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甘油管保存，我就是这样子做的，不过用的40%的甘油，效果很好
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10楼2013-11-21 10:12:24
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