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wanghf_6134

新虫 (初入文坛)

[求助] 菌液保存

蓝白斑培养,摇好的菌液怎么保存呢?查资料说离心沉淀加甘油冷冻,难么具体要怎么做呢?离心后要去掉上清液吗?甘油要杀菌吗?大家有什么好的方法,全一点,多谢啦

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cl_0912

新虫 (初入文坛)


myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香,分子生物期待你更多精彩。 2013-11-20 17:56:56
我们实验室保存菌液是用80%的甘油,甘油要灭菌两次,中间隔一天,然后保存冻存管,我一般是700微升菌液700微升甘油,摇匀后就可以放—20度冰箱了

[ 发自小木虫客户端 ]
2楼2013-11-20 13:15:59
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cl_0912

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

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我们实验室保存菌液是用80%的甘油,甘油要灭菌两次,中间隔一天,然后保存冻存管,我一般是700微升菌液700微升甘油,摇匀后就可以放—20度冰箱了

[ 发自小木虫客户端 ]
3楼2013-11-20 13:16:52
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖


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myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香,分子生物期待你更多精彩。 2013-11-20 17:57:13
一般菌液不用离心,摇过夜的菌液(OD600通常高于2)直接加灭菌甘油至甘油的终浓度为15-20%,混匀后冻存。100%的甘油太粘稠,不好吸。一般是用水稀释成50%或者80%,高压灭菌。
4楼2013-11-20 13:43:30
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wang23212

银虫 (小有名气)

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myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香,分子生物期待你更多精彩。 2013-11-20 17:57:23
配50%的甘油溶液  灭菌
保存时取500微菌液与500微50%甘油混合 然后-20保存
5楼2013-11-20 15:04:47
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wanghf_6134

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
5楼: Originally posted by wang23212 at 2013-11-20 15:04:47
配50%的甘油溶液  灭菌
保存时取500微菌液与500微50%甘油混合 然后-20保存

不用沉淀吗?那这样能保存多久?
6楼2013-11-20 19:06:13
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wanghf_6134

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by cl_0912 at 2013-11-20 13:16:52
我们实验室保存菌液是用80%的甘油,甘油要灭菌两次,中间隔一天,然后保存冻存管,我一般是700微升菌液700微升甘油,摇匀后就可以放—20度冰箱了

灭菌两次后,为什么要隔一天,有讲究吗?还有配好的甘油放-20℃吗
7楼2013-11-20 19:38:07
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junziwood

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

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200ul菌液+800ul的80%甘油,-20或-80冻存就可以了吧
8楼2013-11-20 21:45:21
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wang23212

银虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by wanghf_6134 at 2013-11-20 19:06:13
不用沉淀吗?那这样能保存多久?...

一个月左右 如果长时间不用就放-80
9楼2013-11-21 10:02:39
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zhghlj

新虫 (小有名气)

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甘油管保存,我就是这样子做的,不过用的40%的甘油,效果很好
10楼2013-11-21 10:12:24
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