| 查看: 1239 | 回复: 4 | ||||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||||
肥猫p木虫 (正式写手)
|
[交流]
我的实际使用情况谈各公司pcr mix的宿主基因组残留问题 已有3人参与
|
|||
|
一，天根的taq pcr mix，蓝色。正常价钱是150元每mL，做活动买5mL送5mL，就是相当于75元每mL。感觉还是略贵，但是做一般的pcr用着还不错。 二，TAKARA的绿色mix。这种mix我没买过，是从别的实验室要了一点来试用，感觉pcr的条带比较暗，后来我查了一下它的说明书，貌似里面酶量只是普通pcr的一半。大约是30多元每mL吧。个人感觉，虽然条带不太亮，用来做个菌p或是验证类的pcr还行，可以看到条带；至于其余的比较重要一点的pcr，慎用。 三，康为世纪的Taq MasterMix，蓝色。促销价是166元5mL。 四，康为世纪的Es Taq MasterMix，蓝色。促销价是187元5mL。我打电话问过技术支持，ES Taq与TAq的区别，答曰：ES Taq的保真行和延伸性更好。从延伸性来讲，我个人感觉差不多。我用康为世纪的Taq MasterMix 扩增3kb的条带，没什么问题；用Es Taq MasterMix扩增5kb的条带，目的条带不太明显，泳道有弥散的感觉。至于保真性，我没试过，感觉不太靠谱，只能呵呵。 前两天看见小木虫有人发帖子反映百泰克的2*PCR-MIX里面有宿主菌的基因组残留。于是今天我也试了一下，分别使用天根的taq pcr mix（一）、康为世纪的Taq MasterMix（三）、康为世纪的Es Taq MasterMix（四），不加模板，以16S 通用引物27f和1492r进行pcr扩增30循环，取5uL上样电泳。结果是：天根的taq pcr mix（一）有一条很暗淡的目的大小条带；康为世纪的Taq MasterMix（三）无可见条带；康为世纪的Es Taq MasterMix（四）有一条特别亮的目的大小条带，比marker还亮的那种！我是震惊了。我不确定这些结果是产品批次偶尔有质量问题，还是一直存在。 所以，还是请需要做环境样品文库的虫子们，在扩增16S片段的时候，谨慎使用酶吧。 |
回复此楼» 收录本帖的淘帖专辑推荐
 有价值的生物经验贴 |
» 猜你喜欢
085500求调剂材料
已经有9人回复
-
工科273调剂
已经有7人回复
-
求助调剂，跨调
已经有4人回复
-
生物学调剂
已经有9人回复
-
一志愿哈工大 085600 277 12材科基求调剂
已经有22人回复
-
268分085602化学工程调剂
已经有25人回复
-
机械专硕270求调剂，接受跨专业
已经有14人回复
-
275求调剂
已经有10人回复
-
电气工程专硕320求调剂
已经有4人回复
-
农业管理302分求调剂
已经有3人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 基因工程课程小结
已经有20人回复
- 一必须基因 要做定点突变 方法通过同源重组宿主基因组上基因置换
已经有4人回复
- 【资料】分子生物学常见问题解答
已经有30人回复
妙语1989
金虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 1326.5
- 散金: 31
- 红花: 3
- 帖子: 255
- 在线: 83.5小时
- 虫号: 1131928
- 注册: 2010-10-25
- 性别: MM
- 专业: 药理学其他科学问题
5楼2019-05-06 10:04:29
2楼2013-11-18 12:16:49
3楼2017-05-23 22:33:28
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
|
我用takara的就有问题。菌落pcr成功率为零。举报的是公司员工吧。使用者连这种都不能交流。还有更多人浪费时间金钱在这无谓之中。 发自小木虫Android客户端 |
4楼2017-05-23 22:35:23
