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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 琼脂糖凝胶电泳怪现象
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tiankong很蓝

银虫 (小有名气)

[求助] 琼脂糖凝胶电泳怪现象

求助：我用分子量为4000bp左右的质粒跑琼脂糖电泳，点的marker为2000的，每次跑胶的结果中4000bp的目的条带与marker中2000的条带的距离有时近有时远，距离不定，请问这是为什么啊？
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深呼吸，嘴角上扬，告诉自己：我很好！！！
1楼 2013-11-15 12:48:19
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doglet

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
tiankong很蓝: 金币+5 2013-11-19 09:05:04
看了你的图后
1第一甬道的是质粒，有3条带，大量的是超螺旋，说明质粒提的还可以，酶切后有两条带，但是小条带分子量与预期不符，看看原始质粒是否正确，换一个含有5kb-4kb的marker，用单酶切成一条带看条带大小对不对，否则光用眼睛看是不准的
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15楼2013-11-19 08:54:31
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bolysu

禁虫 (著名写手)
★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+1, 鼓励交流！ 2013-11-15 16:27:18
本帖内容被屏蔽
2楼2013-11-15 13:44:24
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doglet

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2013-11-15 16:10:58
tiankong很蓝: 金币+5, ★有帮助 2013-11-18 16:53:47
首先你的质粒有没有做过酶切，没有的话由于不同的分子构型，可能会不能体现真正的分子量大小，第二，选用适合的marker，才能正确体现分子量的大小，每次行胶的条件不一致，必然看起来每次不同
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3楼2013-11-15 15:15:43
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三蛰

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励交流！ 2013-11-15 16:27:24
质粒提取后没有酶切的话，应该有三条条带。如果只有一条那就不对。另外，电泳过程中胶的质量不同和电泳电压等条件都会出现条带距离不定的现象。
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我不会！
4楼2013-11-15 16:24:58
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