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尼尔墨客

铜虫 (小有名气)


[交流] 求教~~~~如何测荧光强度?

最近用荧光显微镜观测组织中的自发荧光,看到文献里荧光强度是怎么测的?是用软件分析还是用仪器测吗?
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hl16010921

木虫 (正式写手)


★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
尼尔墨客: 金币+1, 谢谢 我再考虑一下 2013-11-17 17:30:03
引用回帖:
9楼: Originally posted by 尼尔墨客 at 2013-11-16 23:46:40
我测的是植物组织里的绿色荧光,加了种荧光探针,目的是看在荧光变化,共聚焦最大倍数40的,这种情况一般算某一固定面积荧光强度么...

组织的情况复杂些,需要筛选计算荧光的细胞,因为可能组织是不同的多种细胞组成的,而有些细胞的荧光强度都有差异。能不能从细胞形态上区别出来?不怕麻烦的话可以将同种细胞(形态上划分)的圈出来统计看看。如果细胞分布均匀算固定面积荧光强度也可以。对于不同情况荧光强度的统计方法也有所区别。有的算等面积的平均强度,有的算阈值高于一定值得平均强度,有的算荧光的累积而不算平均。要选择合适的测量统计方法
10楼2013-11-17 10:19:42
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hl16010921

木虫 (正式写手)


★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
尼尔墨客: 金币+5 2013-11-16 23:43:11
荧光显微照相,得照片,一般用软件分析IPP,imageJ等,可以适应各种情况。
也可以用荧光酶标仪直接测96孔板的细胞,但荧光不均一波动大。
2楼2013-11-15 08:34:03
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尼尔墨客

铜虫 (小有名气)


引用回帖:
2楼: Originally posted by hl16010921 at 2013-11-15 08:34:03
荧光显微照相,得照片,一般用软件分析IPP,imageJ等,可以适应各种情况。
也可以用荧光酶标仪直接测96孔板的细胞,但荧光不均一波动大。

别人也跟我说过IPP 但是有的时候显微照片选择的区域会有不同荧光强度也不一样 而且有的地方荧光比较强有的地方比较弱  那怎么选择 是多拍几张算平均值么
4楼2013-11-15 21:22:47
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userhung

禁虫 (文学泰斗)


顶,blessing, blessing, blessing ! ~~~
6楼2013-11-16 06:44:52
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