24小时热门版块排行榜    

查看: 1345  |  回复: 3
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

gc1027

银虫 (小有名气)

[求助] 聚苯乙烯微球血浆中吸附蛋白检测方法的问题

各位前辈,我最近在做PS微球从血浆中吸附纤维蛋白原(FIB)的试验,我首先采用的方法是检测PS微球吸附前后血浆中FIB的含量,通过吸附前减去吸附后来得到PS微球表面吸附的FIB量,但发现吸附前后血浆中FIB的量变化不大,无显著性差异(采用的是ELISA 试剂盒),所以差值法是行不通的。所以我现在想直接检测PS微球表面的FIB吸附量。
我想用试剂将PS微球表面上的血浆蛋白洗脱下来,再用ELISA进行检测FIB,请问我该选用什么试剂?什么试剂既能有效洗脱蛋白,又能不影响ELISA的试验?SDS肯定不行的。吐温20常被用于ELISA检测这里能不能用于洗脱蛋白?听说尿素也能洗脱蛋白,这里可以用吗?一般浓度多少?能提供相关文献最好,谢谢!
还有没有更好的办法,条件有限,只有一台小酶标仪,所以同位素标记法,荧光标记法,SPR,QCM等方法都不可以使用。
给大家出难题了,小弟不胜感激。
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

feiliulei

银虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by gc1027 at 2013-11-13 13:41:08
因为要测纯血浆中的fib吸附,所以无法通过稀释血浆来降低fib的浓度,目前我已经将微球量增加了,但效果不明显,不知道还有没有更好的改进,谢谢。
...

一定要稀释的,同学。相信我。测前后最大稀释倍数。最好将吸光度稀释至1.0以下。线性关系就好一些了,快感谢我吧。你的试验结果都是2.0以上的吸光度吧,哈哈

[ 发自小木虫客户端 ]
4楼2013-11-15 23:22:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 4 个回答

duruo

荣誉版主 (文坛精英)

孩儿她爹

优秀超版优秀版主优秀区长

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gc1027: 金币+6, 有帮助 2013-11-13 13:34:22
一般PS球上洗脱的蛋白都会变性,这对于你用elisa进行测试是十分不利的
感觉你还是应该测上清液,几点改进意见:
1、PS球的量大一点,fib的其实浓度低一点;
2、Elisa实验是有测试饱和度的,测定时将fib稀释下再测
能攻心则反侧自消,从古知兵非好战;不审势即宽严皆误,后来治蜀要深思
2楼2013-11-13 11:54:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gc1027

银虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by duruo at 2013-11-13 11:54:50
一般PS球上洗脱的蛋白都会变性,这对于你用elisa进行测试是十分不利的
感觉你还是应该测上清液,几点改进意见:
1、PS球的量大一点,fib的其实浓度低一点;
2、Elisa实验是有测试饱和度的,测定时将fib稀释下再测

因为要测纯血浆中的fib吸附,所以无法通过稀释血浆来降低fib的浓度,目前我已经将微球量增加了,但效果不明显,不知道还有没有更好的改进,谢谢。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
3楼2013-11-13 13:41:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] fileCode有新解读? +10 Tide man 2026-08-08 18/900 2026-08-09 12:55 by 仁砚薪传
[考博] 【2027博士申请】纳米药物递送方向 20+3 13586093586 2026-08-03 5/250 2026-08-08 21:54 by 13586093586
[基金申请] 国基金的申报应该改成非等额制,评价高的钱多评价低的钱少,但是增加资助率 +7 a089 2026-08-07 7/350 2026-08-08 18:05 by gltch
[公派出国] 售SCI文章,我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 qTvzQBRAHjCi 2026-08-07 4/200 2026-08-08 17:27 by oEVWOejN9taj
[硕博家园] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 qTvzQBRAHjCi 2026-08-07 4/200 2026-08-08 17:19 by oEVWOejN9taj
[基金申请] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 qTvzQBRAHjCi 2026-08-07 5/250 2026-08-08 17:02 by oEVWOejN9taj
[考博] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +3 Vi50GxzrFcSG 2026-08-07 4/200 2026-08-08 16:27 by oEVWOejN9taj
[考博] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 Vi50GxzrFcSG 2026-08-07 4/200 2026-08-08 16:22 by oEVWOejN9taj
[博后之家] 售SCI一区文章,我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 Vi50GxzrFcSG 2026-08-07 4/200 2026-08-08 16:02 by oEVWOejN9taj
[公派出国] 售SCI文章,我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 HEQlVqMTIA7d 2026-08-07 6/300 2026-08-08 14:39 by oEVWOejN9taj
[基金申请] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 HEQlVqMTIA7d 2026-08-07 4/200 2026-08-08 14:27 by oEVWOejN9taj
[教师之家] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +4 HEQlVqMTIA7d 2026-08-07 5/250 2026-08-08 14:27 by oEVWOejN9taj
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 HEQlVqMTIA7d 2026-08-07 5/250 2026-08-08 14:22 by oEVWOejN9taj
[基金申请] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 KXLV3nuBVBY7 2026-08-07 5/250 2026-08-08 14:07 by oEVWOejN9taj
[教师之家] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 KXLV3nuBVBY7 2026-08-07 5/250 2026-08-08 14:07 by oEVWOejN9taj
[基金申请] 固定端突然变了,今天 +6 archvillain 2026-08-06 10/500 2026-08-07 16:03 by 医学老男孩
[基金申请] 大家散了吧,后缀研究没有意义,别浪费时间了,过好目前的每一天,不要焦虑 +5 Tide man 2026-08-06 7/350 2026-08-07 13:11 by 医学老男孩
[基金申请] filecode +8 布布和一二 2026-08-06 11/550 2026-08-06 20:41 by tangpu318
[基金申请] 求各位大神看下 100+6 hpkpkpkp 2026-08-05 33/1650 2026-08-06 14:49 by zhiyanjiang
[基金申请] 纯娱乐,不喜欢勿喷 +7 Tide man 2026-08-04 10/500 2026-08-04 15:10 by loufangrui
信息提示
请填处理意见