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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » DNA试剂盒提取完DNA后的问题
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7782663

铜虫 (正式写手)

[求助] DNA试剂盒提取完DNA后的问题

http://www.beyotime.com/d0063.htm 这个是碧云天的试剂盒 它的最后一步实在让我郁闷
                     将DNA纯化柱置于一洁净的1.5ml离心管上，加入50-200微升洗脱液。室温放置1-3分钟。≥12000rpm离心1分钟。所得液体即为纯化得到的总DNA。

他竟然加这么多洗脱液  我们跑电泳的时候才用20微升 跪求这步怎么处理
怎么将200微升变成我要的20微升  求高人指点。

总不能说直接从那个200微升中吸取20微升吧 那这个跑电泳的琼脂糖凝胶上肯定不会有DNA条带的。

[ Last edited by 7782663 on 2013-11-12 at 11:43 ]
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1楼 2013-11-12 11:39:08
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7782663

铜虫 (正式写手)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 20093651 at 2013-11-13 08:50:51
肯定的嘛，只要你纯化之前的DNA浓度达标，纯化后取少量电泳肯定没问题的，再说，假如你真只要20u，那后面你操作失误浪费了一个那你是不是还得重新来一次？

我的意思是 估计DNA浓度不达标 因为平时我们最好一步得到液体体积才20微升 去跑胶  而这个最低要50微升少于这个DNA就洗脱不下来了
  我是怕DNA浓度不达标
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14楼2013-11-13 15:11:08
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710002191

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
7782663: 金币+1, ★★★很有帮助 2013-11-13 08:38:56
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2013-11-13 12:38:53
不一定呀，这是提取DNA的标准步骤，我们平时就用一点也照常按照那个做的呀，要是样本含量本身可以的话提取的DNA浓度是可以满足要求的，我们实验用两微升也是按那个做的
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may
2楼2013-11-12 13:27:20
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银杏酸酸

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
7782663: 金币+1, ★★★很有帮助 2013-11-13 08:39:02
是的啊，用它给的标准洗脱液体积洗脱，用的时候取一些，可多次利用。
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3楼2013-11-12 14:51:35
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梧桐柒夕

主管区长 (文坛精英)

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【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
7782663: 金币+1 2013-11-13 08:39:08
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2013-11-13 12:38:59
那个不会有影响的，我跑1%琼脂糖电泳时，只取2ul的，我的洗脱液有时是100ul的，就是条带清晰程度问题，注明的50-200，所以，你完全可以用50的，就是跑出来的特别亮。OMEGA的我做的时候是这样的。不过，你上样量有点小多吧？
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轻描淡写，浓墨重彩。
4楼2013-11-12 15:03:12
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