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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 敲掉一个质粒中十几个碱基
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mabaodi

银虫 (小有名气)

[求助] 敲掉一个质粒中十几个碱基

想要敲掉某个质粒中自带的乳糖启动子（30几个碱基），如何采用简单的方法实现？请有过经验的同学赐教，不甚感激！
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1楼 2013-11-12 10:56:59
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gyesang

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【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
mabaodi: 金币+20 2013-11-12 13:43:00
引用回帖:
3楼: Originally posted by mabaodi at 2013-11-12 11:06:13
有几个问题，重叠延伸配合酶切位点，加入的酶切位点对整个质粒应该没有影响吧？...

我所指的酶切位点是指质粒序列内部本身存在的，不需要引入任何新的酶切位点
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学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com
4楼2013-11-12 11:31:54
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gyesang

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【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
这个是非常容易的啊，有以下几种方法
1. overlap PCR配合酶切连接

2. 用最近发展起来的无缝克隆技术做
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学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com
2楼2013-11-12 11:04:17
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mabaodi

银虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by gyesang at 2013-11-12 11:04:17
这个是非常容易的啊，有以下几种方法
1. overlap PCR配合酶切连接

2. 用最近发展起来的无缝克隆技术做

有几个问题，重叠延伸配合酶切位点，加入的酶切位点对整个质粒应该没有影响吧？
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3楼2013-11-12 11:06:13
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