24小时热门版块排行榜    

查看: 5242  |  回复: 14

萝莉胖

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
10楼: Originally posted by 小熊笨笨run at 2013-11-12 18:32:36
你好!可以展示下你用BSA标曲测所得的原始数据吗?我现在按你所提供的得到的也不是你所说的数值,是不是你取1ml的待测液也进行了一定的稀释?你想到的蛋白状态是否影响测浓度的准确性,这点我没考虑过,但觉得不是 ...

用此标准曲线,测定上述BR溶液浓度,取1ml待测液,与4ml考马斯染液作用10分钟,取3ml测OD595=0.474。根据BSA标曲公式y=0.048x-0.003,已知y=0.474,x=9.9375ug/ml,因为待测液是1ml,所以乘以5,得浓度为9.9375×5=49.6875,近似49.69ug/ml。以上,我想这个应该没啥问题,我没有算错吧。1ml的待测液没有再进行稀释,就是配的1ml未知浓度的蛋白待测样品。
我是自己的神
11楼2013-11-14 09:19:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小熊笨笨run

金虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
11楼: Originally posted by 萝莉胖 at 2013-11-14 09:19:05
用此标准曲线,测定上述BR溶液浓度,取1ml待测液,与4ml考马斯染液作用10分钟,取3ml测OD595=0.474。根据BSA标曲公式y=0.048x-0.003,已知y=0.474,x=9.9375ug/ml,因为待测液是1ml,所以乘以5,得浓度为9.9375×5 ...

恩,你没算错,我算了下得的值是这个,我也不懂什么原因为啥有这么大差别了。
12楼2013-11-14 09:56:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hl16010921

木虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
1.考马斯亮蓝原理在于染料与蛋白形成复合物,而膜蛋白用这种方法显然是测不准的。2.280nm光吸收,依赖氨基酸组成,另外蛋白的高级结构也有影响(芳香氨基酸完全暴露时吸收最大)。BSA和待测蛋白的氨基酸组成差异太大也不行。3.如果550nm的摩尔吸光系数接近BR,分子量相对关系确定,可以用BR做标准曲线,否则,没什么好办法了。膜蛋白不好做准确定量,和BSA差别太大了
13楼2013-11-14 13:26:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Sean2010

捐助贵宾 (著名写手)

Bradford Assay?
自强弘毅,求是拓新
14楼2013-11-28 22:28:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

水也tink

银虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
居然没有看到你的空白标定,是不是考虑将待测液OD值减去空白,带入曲线,并标曲与待测液的混液比例需要一致才行
15楼2014-07-11 16:15:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 萝莉胖 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 能源材料化学课题组招收硕士研究生8-10名 +5 脱颖而出 2026-03-16 16/800 2026-03-22 11:20 by 脱颖而出
[考研] 0856材料专硕353求调剂 +4 NIFFFfff 2026-03-20 4/200 2026-03-22 09:49 by 2026paper
[考研] 考研化学学硕调剂,一志愿985 +5 张vvvv 2026-03-15 7/350 2026-03-21 19:23 by ColorlessPI
[考研] 311求调剂 +3 勇敢的小吴 2026-03-20 3/150 2026-03-21 17:40 by ColorlessPI
[考研] 265求调剂 +12 梁梁校校 2026-03-19 14/700 2026-03-21 13:38 by lature00
[考研] 310求调剂 +3 baibai1314 2026-03-16 3/150 2026-03-21 03:56 by JourneyLucky
[考研] 一志愿 西北大学 ,070300化学学硕,总分287,双非一本,求调剂。 +3 晨昏线与星海 2026-03-18 3/150 2026-03-21 00:46 by JourneyLucky
[考研] 求调剂,一志愿:南京航空航天大学大学 ,080500材料科学与工程学硕,总分289分 +4 @taotao 2026-03-19 4/200 2026-03-20 22:14 by JourneyLucky
[考研] 药学383 求调剂 +3 药学chy 2026-03-15 5/250 2026-03-20 22:11 by 云游重阳
[考研] 290求调剂 +7 ^O^乜 2026-03-19 7/350 2026-03-20 21:43 by JourneyLucky
[考研] A区线材料学调剂 +5 周周无极 2026-03-20 5/250 2026-03-20 21:33 by laoshidan
[考研] 材料学硕297已过四六级求调剂推荐 +11 adaie 2026-03-19 11/550 2026-03-20 21:30 by laoshidan
[考研] 289求调剂 +6 怀瑾握瑜l 2026-03-20 6/300 2026-03-20 20:30 by 学员8dgXkO
[考研] 材料与化工求调剂 +7 为学666 2026-03-16 7/350 2026-03-19 14:48 by 尽舜尧1
[考研] 085600材料与化工调剂 324分 +10 llllkkkhh 2026-03-18 12/600 2026-03-19 14:33 by llllkkkhh
[考研] 材料考研调剂 +3 xwt。 2026-03-19 3/150 2026-03-19 11:22 by w沐阳w
[考研] 本科郑州大学物理学院,一志愿华科070200学硕,346求调剂 +4 我不是一根葱 2026-03-18 4/200 2026-03-19 09:11 by 浮云166
[考研] 085601专硕,总分342求调剂,地区不限 +5 share_joy 2026-03-16 5/250 2026-03-18 14:48 by haxia
[考研] 一志愿南京大学,080500材料科学与工程,调剂 +4 Jy? 2026-03-16 4/200 2026-03-17 11:02 by gaoqiong
[考研] 275求调剂 +4 太阳花天天开心 2026-03-16 4/200 2026-03-17 10:53 by 功夫疯狂
信息提示
请填处理意见