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liondolphin

银虫 (初入文坛)

[求助] 求助~~~~大肠杆菌内质粒会不会自行发生同源重组?

现在在构建质粒,使用的菌株是大肠杆菌BL21(DE3),DH5a,在质粒上加了三段终止子,都是一样的,大约400+bp,话说它们会不会发生同源重组呀,求高手解答~~~~~
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gmingwei102

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
6楼: Originally posted by gastrodia at 2013-11-05 18:04:04
有可能,即使是重组酶缺失的菌株也存在同源重组的情况,我们在实验中就成功地使用DH5a进行同源重组,

我知道这个帖子很久了,但还是爆了一丝希望,希望楼主看到,给点意见。目前也遇到DH5a中扩增质粒,摇的时间长了就会发生重组,STBL3也发生了很大概率的重组,质粒提不出来,跑胶有两个带,,,真的不知道怎么办了!
11楼2016-05-14 01:09:35
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lvshilu

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


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liondolphin: 金币+1 2013-11-07 11:00:27
不会吧,好像没有回文序列吧?重组往哪插入啊?
需要金币
3楼2013-11-05 15:11:28
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liondolphin

银虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by lvshilu at 2013-11-05 15:11:28
不会吧,好像没有回文序列吧?重组往哪插入啊?

不会就太好了~就最近刚开始看同源重组的文献,觉得有三段400bp的同源序列会不会把三个之间的序列通过同源重组给调换位置
4楼2013-11-05 16:46:05
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xiaopeiliang

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
liondolphin: 金币+1 2013-11-07 11:00:19
不会,DH5α和Top10都是rec缺陷型菌株
5楼2013-11-05 17:41:39
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