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bjgymilyxz

木虫 (小有名气)

[求助] 求助--脂肪细胞使用MSC无血清培养基 已有1人参与

各位战友,最近在使用Gibco的MSC无血清培养基培养细胞, 操作方法如下:
首先,使用含10%血清培养基培养3天至细胞融汇;
然后,换成MSC无血清培养基,其中一组进行MSC无血清培养基配制的增殖培养基(Growth Medium,GM)进行正常增殖培养,另一组使用MSC无血清培养基配制的分化培养基(Differentiation Medium,DM)进行诱导分化培养。

诱导分化组出现细胞生长没有问题,但是,正常增殖培养组细胞大量聚集,形成白色团状,脱离细胞培养面,具体情况如下:
GM组更换为无血清培养基后的第1-3天细胞生长及形态均正常。但是,第4天观察到部分细胞出现成团聚集,细胞团的边缘细胞稀少,且渐渐从培养脱落脱离。第6天,GM组的细胞聚集成团现象严重,肉眼可见白色细胞团(非细胞污染),贴壁细胞大量减少。第8天,GM组的细胞几乎脱离细胞培养面,全部聚集成白色团状,极少数细胞贴壁。
想请问大家这究竟是怎么回事??要如何解决??
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cuihuanxian

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
137167741: 应助指数+1, 小木虫交流,共同进步~~ 2013-11-13 13:42:07
bjgymilyxz: 金币+5, 有帮助 2014-01-29 11:18:02
大量细胞聚团是因为细胞增殖过多,细胞老化后聚团飘起,脂肪细胞很容易出现这种现象。你可以调整细胞起始密度、培养时间、或者换液是小心贴壁加液操作等。
2楼2013-11-13 12:37:42
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bjgymilyxz

木虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by cuihuanxian at 2013-11-13 12:37:42
大量细胞聚团是因为细胞增殖过多,细胞老化后聚团飘起,脂肪细胞很容易出现这种现象。你可以调整细胞起始密度、培养时间、或者换液是小心贴壁加液操作等。

试过将密度增加一倍,贴壁加液,但是,还是出现上述情况
因为喜欢,所以担忧,所以后退
3楼2014-01-30 13:36:31
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jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

细胞无血清最多顶3天啊,你又没加血清替代试剂,细胞肯定挂了。
4楼2014-02-11 17:21:50
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bjgymilyxz

木虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by jurkat.1640 at 2014-02-11 17:21:50
细胞无血清最多顶3天啊,你又没加血清替代试剂,细胞肯定挂了。

当然加了血清替代剂的。
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5楼2014-02-12 17:32:41
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