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liaohongbin

金虫 (初入文坛)

★ ★
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2014-01-27 19:52:19
可以用两个酶,分别对载体进行分布单切,t4自连转一下。看看是不是其中一个酶不好,或者直接换新的酶。
连接效率不太高,增加目的片段浓度,延长连接时间,推荐4℃过夜连接。
转化时顺便测一下转化效率,低于10^6换感受态。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
11楼2013-11-07 14:26:54
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林默泪

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
11楼: Originally posted by liaohongbin at 2013-11-07 14:26:54
可以用两个酶,分别对载体进行分布单切,t4自连转一下。看看是不是其中一个酶不好,或者直接换新的酶。
连接效率不太高,增加目的片段浓度,延长连接时间,推荐4℃过夜连接。
转化时顺便测一下转化效率,低于10^6 ...

谢谢,我试试看。
12楼2013-11-08 08:47:15
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hitslu

银虫 (初入文坛)

长不出来或者长得少,很有可能是感受态细胞没做好,我以前出现过这种情况,换了新细胞做的感受态就长得很好了
13楼2013-12-19 10:40:18
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