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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 克隆转化，转化子就是不含目的基因。
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liaohongbin

金虫 (初入文坛)
★ ★
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2014-01-27 19:52:19
可以用两个酶，分别对载体进行分布单切，t4自连转一下。看看是不是其中一个酶不好，或者直接换新的酶。
连接效率不太高，增加目的片段浓度，延长连接时间，推荐4℃过夜连接。
转化时顺便测一下转化效率，低于10^6换感受态。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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11楼2013-11-07 14:26:54
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林默泪

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
11楼: Originally posted by liaohongbin at 2013-11-07 14:26:54
可以用两个酶，分别对载体进行分布单切，t4自连转一下。看看是不是其中一个酶不好，或者直接换新的酶。
连接效率不太高，增加目的片段浓度，延长连接时间，推荐4℃过夜连接。
转化时顺便测一下转化效率，低于10^6 ...

谢谢，我试试看。
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12楼2013-11-08 08:47:15
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hitslu

银虫 (初入文坛)
长不出来或者长得少，很有可能是感受态细胞没做好，我以前出现过这种情况，换了新细胞做的感受态就长得很好了
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13楼2013-12-19 10:40:18
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