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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 两次体外转录所得的RNA，经电泳检测，大小不一样
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laojiu9878

至尊木虫 (文坛精英)

九牛

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
二级结构的出现，影响了转录的长度
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但愿人长久
11楼2013-11-05 08:26:26
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machao8405

木虫 (正式写手)
引用回帖:
11楼: Originally posted by laojiu9878 at 2013-11-05 08:26:26
二级结构的出现，影响了转录的长度

我也这么认为，RNA有二级结构，影响了迁移速度，但是loading buffer不是有打开二级结构的作用么？而且两次的结果为啥二级结构不一样呢？  两次实验最可能不一样的地方就是胶的浓度可能不太一样，还有就是在产物在冰上的放置时间不太一样，但是这些也都差的不远，而且每次的三个产物位置都是相近的，不知道转录出来的东西是不是我要的
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12楼2013-11-05 10:04:54
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laojiu9878

至尊木虫 (文坛精英)

九牛

【答案】应助回帖

重新重复，仔细认真
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但愿人长久
13楼2013-11-06 08:35:33
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j-levell

新虫 (初入文坛)
学习了
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14楼2014-03-17 14:51:01
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j-levell

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
11楼: Originally posted by laojiu9878 at 2013-11-05 08:26:26
二级结构的出现，影响了转录的长度

如何在体外转录中避免二级结构出现？如果想得到正确的转录产物就必须阻止二级结构形成吗？比如用体外转录产物转染细胞拯救病毒的时候。
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15楼2014-03-17 14:52:52
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xuesen1223

新虫 (初入文坛)
我做的体外转录，以pcr产物为模版居然出现两条带，怎么办，还能用吗
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16楼2014-05-26 18:39:28
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songzuowei

木虫 (著名写手)
大哥 您这体外转录成的RNA是跑普通琼脂糖凝胶电泳检测的吗 不是体外转录成的RNA是单链吗怎么能跑呢？望赐教，谢谢！
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17楼2014-08-12 13:23:31
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machao8405

木虫 (正式写手)
引用回帖:
17楼: Originally posted by songzuowei at 2014-08-12 13:23:31
大哥 您这体外转录成的RNA是跑普通琼脂糖凝胶电泳检测的吗 不是体外转录成的RNA是单链吗怎么能跑呢？望赐教，谢谢！

谁说单链不能电泳
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18楼2014-08-12 14:27:23
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songzuowei

木虫 (著名写手)
引用回帖:
18楼: Originally posted by machao8405 at 2014-08-12 14:27:23
谁说单链不能电泳...

也就是说单链RNA跑琼脂糖凝胶电泳照样能跑出条带吗？那这单链RNA结合EB的原理是什么？
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19楼2014-08-12 14:30:20
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machao8405

木虫 (正式写手)
任何核酸结合EB的原理应该都类似吧，都是EB插入结合到核酸上，具体没深究过
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20楼2014-08-13 17:29:19
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