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南方科技大学公共卫生及应急管理学院2025级博士研究生招生报考通知
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machao8405

木虫 (正式写手)

[求助] 两次体外转录所得的RNA,经电泳检测,大小不一样

以线性化DNA为模板进行体外转录,两次条件相同,但是转录出来的RNA大小不一样,是怎么个情况?
两次体外转录所得的RNA,经电泳检测,大小不一样
体外转录.jpg
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machao8405

木虫 (正式写手)

引用回帖:
11楼: Originally posted by laojiu9878 at 2013-11-05 08:26:26
二级结构的出现,影响了转录的长度

我也这么认为,RNA有二级结构,影响了迁移速度,但是loading buffer不是有打开二级结构的作用么?而且两次的结果为啥二级结构不一样呢?  两次实验最可能不一样的地方就是胶的浓度可能不太一样,还有就是在产物在冰上的放置时间不太一样,但是这些也都差的不远,而且每次的三个产物位置都是相近的,不知道转录出来的东西是不是我要的
12楼2013-11-05 10:04:54
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沙门小rna

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
machao8405(myprayer代发): 金币+1, 赠人玫瑰,手有余香。分子生物期待你更多精彩 。 2013-11-04 08:33:06
1个可能,rna降解了,据观察电泳中没有rna的完整3条带。2,电泳跑歪了(据我观察,图2的marker也歪了)
应助之星就是我~没错。你没有看错~
2楼2013-11-03 22:17:15
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machao8405

木虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 沙门小rna at 2013-11-03 22:17:15
1个可能,rna降解了,据观察电泳中没有rna的完整3条带。2,电泳跑歪了(据我观察,图2的marker也歪了)

亲,我这个不是提取组织的RNA,完全没有弥散现象,所以,不要动不动就说降解的事儿
3楼2013-11-03 22:19:31
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沙门小rna

金虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by machao8405 at 2013-11-03 22:19:31
亲,我这个不是提取组织的RNA,完全没有弥散现象,所以,不要动不动就说降解的事儿...

亲请看你图一的胶孔是多么的不齐,我觉得是这个原因。还有。体外转录系统里没有rna酶不代表不降解。。
应助之星就是我~没错。你没有看错~
4楼2013-11-03 22:34:39
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