24小时热门版块排行榜    

查看: 2955  |  回复: 8
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)

[求助] 求教dynabeads磁珠做IP的几个问题

1.按照说明的量混合抗体与磁珠,室温30 min,未做交联,与蛋白质样品孵育4℃过夜,IP未钓到目的蛋白,操作上有什么问题?

2.蛋白G磁珠的直径好像比琼脂糖珠小很多,是否可以用未剪口的枪头吹洗?
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 一步一步 at 2013-10-27 09:51:53
不是很懂CoIP,但是接触过用磁珠做IP实验。所以在此有几个问题:
1. 你的磁珠和抗体为什么不交联?
2. 加磁珠的目的不就是让目的蛋白结合到抗体上,利用磁力作用去杂。不与磁珠交联,即使抗体与蛋白结合也不能与杂 ...

说明书上说交联是选做项,而且交联有点麻烦所以没做。
蛋白G琼脂糖珠与抗体抗原孵育时是没有交联步骤。
5楼2013-10-27 18:03:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 9 个回答

bullfrog325

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
jurkat.1640: 金币+1, 有帮助 2013-10-25 12:18:45
137167741: 金币+1, 鼓励交流 2013-10-27 21:06:04
会不会目标蛋白的标识部分被包裹在内部?
2楼2013-10-24 22:51:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)

引用回帖:
2楼: Originally posted by bullfrog325 at 2013-10-24 22:51:22
会不会目标蛋白的标识部分被包裹在内部?

这个是另外一个问题,我主要关心的是操作上有没有问题,因为没做个磁珠的CoIP实验,也没人教
3楼2013-10-25 12:18:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

一步一步

木虫 (著名写手)

★ ★
137167741: 金币+2, 鼓励交流 2013-10-27 21:06:22
不是很懂CoIP,但是接触过用磁珠做IP实验。所以在此有几个问题:
1. 你的磁珠和抗体为什么不交联?
2. 加磁珠的目的不就是让目的蛋白结合到抗体上,利用磁力作用去杂。不与磁珠交联,即使抗体与蛋白结合也不能与杂质蛋白区别,加磁珠还有什么用?
4楼2013-10-27 09:51:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 我不理解! +19 Edward_pc 2026-08-26 27/1350 2026-09-02 12:08 by Ai19911123
[基金申请] 要骂人了,新模版改版就是要淡化问题凝练这种虚的东西,结果有个评委还在说凝练得不够 +9 瞬息宇宙 2026-08-31 16/800 2026-09-02 12:07 by Ai19911123
[基金申请] 基金系统什么内容也没有 30+4 winsaint 2026-08-27 10/500 2026-09-02 11:35 by 大不刘6
[基金申请] 科研人应该花精力去思考如何解决问题,而不是去凝练问题 +4 瞬息宇宙 2026-09-01 8/400 2026-09-02 10:35 by 瞬息宇宙
[基金申请] 学科评审组评审是指会评吗? +5 瞬息宇宙 2026-08-31 5/250 2026-09-02 10:13 by 雨冰共舞
[文学芳草园] 梦想 +5 myrtle 2026-08-26 8/400 2026-09-02 02:42 by Leogzhya
[基金申请] 面上合作单位盖章 +6 ssyjh 2026-08-27 9/450 2026-09-01 20:01 by huagongfeihu
[基金申请] 面上函评意见出来了,像什么等级? 20+4 Tsingking1 2026-08-27 17/850 2026-09-01 19:51 by 超级无敌华子
[基金申请] 麻烦专家们看看评委们的意见(F口面上) +7 gdd2018 2026-08-28 12/600 2026-09-01 08:32 by 尼古拉斯小虫
[基金申请] 国社科又开始会评了,不知道这次命运如何 +7 雨打竹帘 2026-08-30 11/550 2026-08-31 23:16 by hittle2008
[基金申请] 面上意见出来了 +12 黄鸟于飞Chao 2026-08-29 23/1150 2026-08-31 18:57 by 黄鸟于飞Chao
[基金申请] 中青基了要发朋友圈吗? +7 349506619 2026-08-28 7/350 2026-08-31 13:39 by 冼亮淀粉酶
[基金申请] 29号明天会评吗 +4 笨笨唐 2026-08-28 4/200 2026-08-31 09:30 by huixian257
[基金申请] 基金不中,共勉 +12 eulota 2026-08-26 12/600 2026-08-31 08:42 by ZJTJZ
[基金申请] 为什么到现在没收到通知? +5 tannykie 2026-08-29 5/250 2026-08-30 21:05 by purplejack
[考博] 找导师 +6 yuanjiabao 2026-08-29 7/350 2026-08-30 14:40 by 生科新手
[基金申请] 我就是申请一个面上项目而已,这评审意见是按照杰青的条件评的吧? +6 gouxfjh 2026-08-28 11/550 2026-08-30 07:57 by gouxfjh
[基金申请] 国自然评审意见 +13 wangmingqi 2026-08-28 19/950 2026-08-29 10:22 by Poppy1104
[基金申请] 2026年叶企孙基金 +4 bud_bud 2026-08-27 7/350 2026-08-29 07:23 by foolishmani
[基金申请] 看板上这么多中的,有点像50人群里49个人都是骗子的那种感觉…… +5 a089 2026-08-26 6/300 2026-08-27 14:05 by jonewore
信息提示
请填处理意见