应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 求教dynabeads磁珠做IP的几个问题
91/1返回列表
查看: 2949  |  回复: 8
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)

[求助] 求教dynabeads磁珠做IP的几个问题

1.按照说明的量混合抗体与磁珠，室温30 min，未做交联，与蛋白质样品孵育4℃过夜，IP未钓到目的蛋白，操作上有什么问题？

2.蛋白G磁珠的直径好像比琼脂糖珠小很多，是否可以用未剪口的枪头吹洗？
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

细胞生物学实验经验

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

shayin

» 猜你喜欢
1楼 2013-10-24 14:45:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bullfrog325

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
jurkat.1640: 金币+1, ★有帮助 2013-10-25 12:18:45
137167741: 金币+1, 鼓励交流 2013-10-27 21:06:04
会不会目标蛋白的标识部分被包裹在内部?
赞一下 回复此楼
2楼2013-10-24 22:51:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)
引用回帖:
2楼: Originally posted by bullfrog325 at 2013-10-24 22:51:22
会不会目标蛋白的标识部分被包裹在内部?

这个是另外一个问题，我主要关心的是操作上有没有问题，因为没做个磁珠的CoIP实验，也没人教
赞一下 回复此楼
3楼2013-10-25 12:18:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

一步一步

木虫 (著名写手)
★ ★
137167741: 金币+2, 鼓励交流 2013-10-27 21:06:22
不是很懂CoIP，但是接触过用磁珠做IP实验。所以在此有几个问题：
1. 你的磁珠和抗体为什么不交联？
2. 加磁珠的目的不就是让目的蛋白结合到抗体上，利用磁力作用去杂。不与磁珠交联，即使抗体与蛋白结合也不能与杂质蛋白区别，加磁珠还有什么用？
赞一下 回复此楼
4楼2013-10-27 09:51:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 一步一步 at 2013-10-27 09:51:53
不是很懂CoIP，但是接触过用磁珠做IP实验。所以在此有几个问题：
1. 你的磁珠和抗体为什么不交联？
2. 加磁珠的目的不就是让目的蛋白结合到抗体上，利用磁力作用去杂。不与磁珠交联，即使抗体与蛋白结合也不能与杂 ...

说明书上说交联是选做项，而且交联有点麻烦所以没做。
蛋白G琼脂糖珠与抗体抗原孵育时是没有交联步骤。
赞一下 回复此楼
5楼2013-10-27 18:03:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

springs954

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
jurkat.1640: 金币+2, ★有帮助 2013-11-14 09:39:19
jurkat.1640: 金币+1 2014-01-14 12:59:38
jurkat.1640: 金币+3 2014-04-14 15:41:52
如果没有蛋白酶存在，4度对于保持蛋白构象好，但室温温度高亲和度要高。钓不到的原因很多，最有可能是你的靶蛋白变性了结构变了。

如果是1毫升枪头不需切，其它最好切一下。
赞一下 回复此楼
6楼2013-11-13 16:16:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

shayin

新虫 (初入文坛)
送红花一朵
你好，我现在也在用磁珠做IP钓互作蛋白，我想问您最后钓到蛋白了么，还是用了别的方法？
赞一下 回复此楼
你若盛开，碟自来。。。
7楼2016-11-01 16:25:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)
引用回帖:
7楼: Originally posted by shayin at 2016-11-01 16:25:48
你好，我现在也在用磁珠做IP钓互作蛋白，我想问您最后钓到蛋白了么，还是用了别的方法？

很多年了
回复此楼
8楼2016-11-02 09:23:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

shayin

新虫 (初入文坛)
内容已删除
回复此楼
你若盛开，碟自来。。。
9楼2016-11-02 14:49:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 jurkat.1640 的主题更新
91/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 面上函评意见出来了，像什么等级？ 20+4 Tsingking1 2026-08-27 17/850 2026-09-01 19:51 by 超级无敌华子
[文学芳草园] 梦想 +5 myrtle 2026-08-26 7/350 2026-09-01 15:18 by myrtle
[基金申请] 学科评审组评审是指会评吗？ +4 瞬息宇宙 2026-08-31 4/200 2026-09-01 14:58 by jiaoxg
[基金申请] 为什么资助数各大高校都创新高，自己申请怎么就这么难 +13 Kittylucky 2026-08-27 14/700 2026-09-01 11:06 by feng6531
[基金申请] 麻烦专家们看看评委们的意见（F口面上） +7 gdd2018 2026-08-28 12/600 2026-09-01 08:32 by 尼古拉斯小虫
[基金申请] 国社科又开始会评了，不知道这次命运如何 +7 雨打竹帘 2026-08-30 11/550 2026-08-31 23:16 by hittle2008
[基金申请] 面上意见出来了 +12 黄鸟于飞Chao 2026-08-29 23/1150 2026-08-31 18:57 by 黄鸟于飞Chao
[基金申请] 中青基了要发朋友圈吗？ +7 349506619 2026-08-28 7/350 2026-08-31 13:39 by 冼亮淀粉酶
[基金申请] 为什么到现在没收到通知？ +5 tannykie 2026-08-29 5/250 2026-08-30 21:05 by purplejack
[基金申请] 有没有仍没收到信息的 +7 德尚中行 2026-08-27 8/400 2026-08-30 20:52 by purplejack
[考博] 找导师 +6 yuanjiabao 2026-08-29 7/350 2026-08-30 14:40 by 生科新手
[基金申请] 系统查不到 +11 董八千 2026-08-26 11/550 2026-08-28 18:06 by Leogzhya
[基金申请] 怎么查啊 +6 huang1991js 2026-08-26 6/300 2026-08-28 08:42 by winsaint
[基金申请] 我不理解！ +15 Edward_pc 2026-08-26 23/1150 2026-08-26 20:34 by zzuzxg
[基金申请] 出来了 +9 trojank 2026-08-26 9/450 2026-08-26 14:25 by 宝贝虫子
[基金申请] 国际合作可查了，中了面上 (EPI+1)(金币+50) +18 Ldrop2023 2026-08-26 18/900 2026-08-26 11:15 by cmrandy
[基金申请] 系统进不去 +4 yanglien 2026-08-26 5/250 2026-08-26 11:10 by wenfengw83
[基金申请] 项目信息和经费信息在系统里都可以看到了 +6 wittyboy 2026-08-26 14/700 2026-08-26 10:55 by wittyboy
[基金申请] 国合可查了 +3 paperzjh 2026-08-26 3/150 2026-08-26 10:41 by LemmonTr
[基金申请] 牛来！米来！面来！ +8 beefly 2026-08-26 8/400 2026-08-26 08:37 by xuzhipiao
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭