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w雨过天晴j

新虫 (初入文坛)

[求助] PCR

人说做个PCR，发来条件是95度30秒，65度30秒，72度1分20秒，25个循环，然后又说反应最开始是95 5min，25个循环之后是72 10min，12 forever，什么意思啊？？这是，30秒变成了5分钟？？？菜鸟一枚望指教
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1楼 2013-10-23 17:04:29
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踏雪314

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2013-10-24 00:28:06
前面那个是说循环中的温度和时间，后面说的是整个反应的预变性和总延伸，完整的程序应该是这样的：
预变性  95℃  5min
变性    95℃  30s
退火    65℃  30s
延伸    72℃  1min20s
总延伸  72℃  10min
保存    12℃  forever
变性、退火、延伸三步循环25次（我不会打大括号，只能这么表述了）
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3楼2013-10-23 17:12:49
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platanus

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
他没有给你发全，全部程序是这样的：1.95度5min，2.95度30s，3.65度30s，4.72度1分20s，2-4跑25个循环，之后72度10分钟，最后12度保温。
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2楼2013-10-23 17:12:40
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taccycle

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
串起来就是 95℃ 5min（预变性），【95℃ 30s（变性），65℃ 30s（退火），72℃ 80s（延伸）】×25循环，72℃ 10min（总延伸），12℃ forever（结束）
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用心
4楼2013-10-23 17:13:35
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xhp_1638

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2013-10-24 00:28:17
同意楼上所说的，在循环结束后有个总延伸，而且时间长久点。最后是12度保存
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发展才是硬道理！
5楼2013-10-23 20:45:25
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