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w雨过天晴j

新虫 (初入文坛)

[求助] PCR

人说做个PCR,发来条件是95度30秒,65度30秒,72度1分20秒,25个循环,然后又说反应最开始是95 5min,25个循环之后是72 10min,12 forever,什么意思啊??这是,30秒变成了5分钟???菜鸟一枚望指教
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platanus

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

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他没有给你发全,全部程序是这样的:1.95度5min,2.95度30s,3.65度30s,4.72度1分20s,2-4跑25个循环,之后72度10分钟,最后12度保温。
2楼2013-10-23 17:12:40
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踏雪314

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
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gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2013-10-24 00:28:06
前面那个是说循环中的温度和时间,后面说的是整个反应的预变性和总延伸,完整的程序应该是这样的:
预变性  95℃  5min
变性    95℃  30s
退火    65℃  30s
延伸    72℃  1min20s
总延伸  72℃  10min
保存    12℃  forever
变性、退火、延伸三步循环25次(我不会打大括号,只能这么表述了)
3楼2013-10-23 17:12:49
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taccycle

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
串起来就是 95℃ 5min(预变性),【95℃ 30s(变性),65℃ 30s(退火),72℃ 80s(延伸)】×25循环,72℃ 10min(总延伸),12℃ forever(结束)
用心
4楼2013-10-23 17:13:35
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xhp_1638

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2013-10-24 00:28:17
同意楼上所说的,在循环结束后有个总延伸,而且时间长久点。最后是12度保存
发展才是硬道理!
5楼2013-10-23 20:45:25
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