| 查看: 1722 | 回复: 7 | ||||
[求助]
植物表达蛋白，能看到荧光，westernblot 却杂不出来，为什么？
|
|
在植物体中，表达了一个融合GFP的蛋白，看荧光是有的，然后取样做western，却杂不出来，阳性对照能杂出来，请问大家有没有遇到这种情况？ 我把头皮想破了还是想不出为什么....谢谢！ |
回复此楼» 收录本帖的淘帖专辑推荐
 蛋白质生物学实验经验 |
» 猜你喜欢
不合理蛙科研实验中的趣事：实验器材的 “乌龙”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：和实验材料的 “斗智斗勇”
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有267人回复
-
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
-
纳米粒度分析
已经有3人回复
-
林科院林化所招收材料与化工专业硕士，坐标南京
已经有0人回复
feichen2008
银虫 (小有名气)
- 应助: 4 (幼儿园)
- 金币: 688.9
- 散金: 96
- 帖子: 216
- 在线: 148.2小时
- 虫号: 1254299
- 注册: 2011-04-03
- 性别: MM
- 专业: 植物病理学
2楼2013-10-22 10:31:45
3楼2013-10-23 08:46:42
凌波丽
专家顾问 (知名作家)
-
专家经验: +218 - MolEPI: 44
- 应助: 397 (硕士)
- 贵宾: 0.044
- 金币: 2118.9
- 散金: 10
- 红花: 208
- 帖子: 5633
- 在线: 571.6小时
- 虫号: 1766465
- 注册: 2012-04-19
- 性别: MM
- 专业: 生物大分子结构与功能
- 管辖: 生物科学综合
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+4, 鼓励交流 2013-10-23 10:38:19
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+4, 鼓励交流 2013-10-23 10:38:19
|
最可能的一种情况，目的蛋白质与GFP共价连接后的新的蛋白质的空间结构发生了改变，GFP那部分还是天然构象，但是目的蛋白的表位因为目地蛋白质折叠异常或者因为GFP形成的空间位阻使得抗原表位被遮盖。可以用蛋白质的三维结构预测软件预测一下目的蛋白质与GFP共价连接后的新的蛋白质的空间结构，看看目的蛋白质的构象与天然构象是不是发生了改变。 目的蛋白质与GFP共价连接之间的肽链也该是数个亲水的氨基酸残基，这样对于目的蛋白质与GFP各自的折叠影响较小。 |
4楼2013-10-23 10:16:28
zhouxiaofei
银虫 (小有名气)
- 应助: 11 (小学生)
- 金币: 369
- 帖子: 132
- 在线: 113.5小时
- 虫号: 1807658
- 注册: 2012-05-10
- 性别: GG
- 专业: 免疫生物学
5楼2013-10-23 10:26:55
凌波丽
专家顾问 (知名作家)
-
专家经验: +218 - MolEPI: 44
- 应助: 397 (硕士)
- 贵宾: 0.044
- 金币: 2118.9
- 散金: 10
- 红花: 208
- 帖子: 5633
- 在线: 571.6小时
- 虫号: 1766465
- 注册: 2012-04-19
- 性别: MM
- 专业: 生物大分子结构与功能
- 管辖: 生物科学综合
6楼2013-10-23 11:01:12
zhangxn2010
木虫 (著名写手)
让一切随风飞翔
- MolEPI: 1
- 应助: 14 (小学生)
- 金币: 2450.9
- 散金: 923
- 红花: 7
- 帖子: 2880
- 在线: 284小时
- 虫号: 972619
- 注册: 2010-03-16
- 专业: 神经生物学
7楼2013-10-25 11:19:34
Dr.SCN
铜虫 (初入文坛)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 262.5
- 散金: 85
- 帖子: 10
- 在线: 4.5小时
- 虫号: 2805179
- 注册: 2013-11-16
- 性别: GG
- 专业: 植物病理学
8楼2013-11-16 15:32:36
